[發(fā)明專利]乙肝病毒前S1抗原檢測(cè)試劑盒及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210316765.7
• 申請(qǐng)日: 2012-08-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102798718A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-11-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳玉水;戴振賢;張劍清;林炳為
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建省洪誠(chéng)生物藥業(yè)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/576
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/576;G01N33/535;G01N21/76
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種乙肝病毒前S1抗原檢測(cè)試劑盒，包括乙肝病毒前S1抗原陰性對(duì)照品和乙肝病毒前S1抗原陽(yáng)性對(duì)照品、乙肝病毒前S1抗體包被微孔板、酶標(biāo)記抗乙肝病毒表面抗原抗體的標(biāo)記結(jié)合物、化學(xué)發(fā)光底物液和濃縮洗滌液，其特征在于包被濃度為2.5μg/mL。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述乙肝病毒前S1抗原陰性對(duì)照品為采用10份正常人的血清混勻后制得，所述乙肝病毒前S1抗原陽(yáng)性對(duì)照品為臨床乙肝病毒前S1抗原陽(yáng)性血清稀釋后制得。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述標(biāo)記結(jié)合物為辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗乙肝病毒表面抗原抗體，稀釋倍數(shù)為1∶2500。

4.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于：所述化學(xué)發(fā)光底物液為魯米諾化學(xué)發(fā)光底物液，所述魯米諾化學(xué)發(fā)光底物液包括底物A液和底物B液，其中所述底物A液包括1.8g/L的魯米諾和0.2g/L的對(duì)碘苯酚，所述底物B液包括0.5g/L的過(guò)氧化脲。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述濃縮洗滌液為30倍濃縮洗滌液，所述30倍濃縮洗滌液為加入濃度為1.5g/L的吐溫-20和體積比為0.05％PC300防腐劑的0.3M?pH7.4的磷酸鹽緩沖液。

6.一種乙肝病毒前S1抗原檢測(cè)試劑盒的制備方法，其特征在于，該方法包括：

制備乙肝病毒前S1抗原陰性對(duì)照品和乙肝病毒前S1抗原陽(yáng)性對(duì)照品；

制備乙肝病毒前S1抗體包被的包被微孔板；

制備標(biāo)記結(jié)合物，所述標(biāo)記結(jié)合物為酶標(biāo)記的抗乙肝病毒表面抗原抗體；

制備化學(xué)發(fā)光底物液；以及

制備濃縮洗滌液；

其中，制備乙肝病毒前S1抗體包被的包被微孔板包括：用包被液將乙肝病毒前S1單克隆抗體稀釋成包被濃度為2.5μg/mL，以每孔100μl加入微孔板，然后置于4℃冰箱48小時(shí)；

棄去微孔板中的包被液，然后每孔加入150μl的封閉液，置于4℃冰箱封閉24小時(shí)；

棄去封閉液后，置于37℃孵育箱8小時(shí)烘干。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，制備乙肝病毒前S1抗原陰性對(duì)照品和乙肝病毒前S1抗原陽(yáng)性對(duì)照品包括：

采用10份正常人的血清混勻后制得所述乙肝病毒前S1抗原陰性對(duì)照品；

臨床乙肝病毒前S1抗原陽(yáng)性血清稀釋后制得所述乙肝病毒前S1抗原陽(yáng)性對(duì)照品。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于：所述標(biāo)記結(jié)合物為通過(guò)戊二醛二步法制得的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗乙肝病毒表面抗原單克隆抗體的稀釋液，稀釋濃度為1∶2500。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述化學(xué)發(fā)光底物液為魯米諾化學(xué)發(fā)光底物液，所述魯米諾化學(xué)發(fā)光底物液包括底物A液和底物B液；

所述底物A液用0.05M?pH8.6的Tris-HCl緩沖液溶解魯米諾和對(duì)碘苯酚制得，其中魯米諾濃度為1.8g/L，對(duì)碘苯酚濃度為0.2g/L；

所述底物B液用0.05M?pH8.6的Tris-HCl緩沖液稀釋過(guò)氧化脲制得，其中過(guò)氧化脲的濃度為0.5g/L。

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述制備濃縮洗滌液包括：稱取0.89克NaH₂PO₄·2H₂O和5.56克KH₂PO₄·3H₂O，加到100ml水中，然后加入150μl吐溫-20和50μl?PC300。