[發(fā)明專利]一種精制谷胱甘肽發(fā)酵液的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210313822.6
• 申請(qǐng)日: 2012-08-20
• 公開（公告）號(hào): CN102827244A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳健輝;朱義福;饒漢生;江燕斌;馬建;鄭凝堅(jiān)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東肇慶星湖生物科技股份有限公司;華南理工大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K5/037
• 分類號(hào): C07K5/037;C07K1/16
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 羅曉林

1.一種精制谷胱甘肽發(fā)酵液的方法，其特征在于包括步驟如下：

(1)樣品的預(yù)處理：對(duì)發(fā)酵菌種經(jīng)過破壁處理后的谷胱甘肽抽提液進(jìn)行離心、超濾處理，再用大孔吸附樹脂對(duì)其初步純化處理得預(yù)洗脫液，收集并濃縮預(yù)洗脫液得到谷胱甘肽粗品；

(2)調(diào)節(jié)粗品pH：用0.1mol/L的鹽酸溶液調(diào)節(jié)步驟(1)所得的谷胱甘肽粗品的pH值為3.0～3.5；

(3)參數(shù)設(shè)置和進(jìn)樣：設(shè)置制備型液相色譜的操作參數(shù)，掃描波長(zhǎng)為210±10nm，掃描時(shí)間為60±5min，同時(shí)對(duì)流動(dòng)相流速及流動(dòng)相組分進(jìn)行設(shè)定，基線水平后進(jìn)樣，經(jīng)制備型液相色譜分離后得洗脫液；

(4)收集洗脫液：當(dāng)響應(yīng)值大于100mAU后開始收集流出的洗脫液，并對(duì)每個(gè)響應(yīng)峰分別收集，用亞硝基鐵氰化鉀法對(duì)收集液進(jìn)行定性判斷，收集谷胱甘肽高峰液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制谷胱甘肽發(fā)酵液的方法，其特征在于：步驟(1)得到的谷胱甘肽粗品濃度優(yōu)選為5g/L～10g/L，以質(zhì)量百分比計(jì)，經(jīng)過步驟(1)得到的谷胱甘肽粗品純度為45％～55％。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的精制谷胱甘肽發(fā)酵液的方法，其特征在于：步驟(3)中，所用的流動(dòng)相是甲醇溶液，其濃度為5％～10％。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的精制谷胱甘肽發(fā)酵液的方法，其特征在于：步驟(3)中，所用流動(dòng)相流速為3mL/min～5mL/min。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的精制谷胱甘肽發(fā)酵液的方法，其特征在于：步驟(4)中，收集谷胱甘肽高峰液區(qū)域?yàn)?3min-20min。