[發明專利]綠色巴夫藻培養基配方及三級培養方法

有效

• 申請號: 201210301002.5
• 申請日: 2012-08-23
• 公開（公告）號: CN102851213A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 王培磊
• 申請（專利權）人: 王培磊
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種綠色巴夫藻培養基配方，其特征在于該綠色巴夫藻培養基配方如下：CO(NH₂)₂(尿素)108mg，KH₂PO₄?8mg，NaHCO₃?500mg，九二0植物生長刺激素(赤霉素)5國際單位，f/2微量元素溶液1毫升，f/2維生素溶液1毫升，海水1000毫升；其中f/2微量元素溶液配方：ZnSO₄·4H₂O?23毫克，MnCl₂·4H₂O?178毫克，CuSO₄·5H₂O?10毫克，FeC₆H₅O₇·5H₂O?3.9克，Na₂MoO₄·2H₂O?7.3毫克，CoCl₂·6H₂O?12毫克，Na₂EDTA?4.35克，純凈水1000毫升；f/2維生素溶液配方：維生素B₁₂?0.5毫克，維生素B₁100毫克，維生素H0.5毫克，純凈水1000毫升。

2.一種綠色巴夫藻培養基配方，其特征在于該綠色巴夫藻培養基配方如下：CO(NH₂)₂(尿素)108mg，KH₂PO₄8mg，NaHCO₃500mg，體積比1％的鉬酸水溶液15ml，硫酸錳5mg，磷酸二氫鉀10mg，氯化鉀3mg，九二0植物生長刺激素(赤霉素)5國際單位，f/2微量元素溶液1毫升，f/2維生素溶液1毫升，海水1000毫升；其中f/2微量元素溶液配方：ZnSO₄·4H₂O23毫克，MnCl₂·4H₂O178毫克，CuSO₄·5H₂O10毫克，FeC₆H₅O₇·5H₂O3.9克，Na₂MoO₄·2H₂O7.3毫克，CoCl₂·6H₂O12毫克，Na₂EDTA4.35克，純凈水1000毫升；f/2維生素溶液配方：維生素B₁₂0.5毫克，維生素B₁100毫克，維生素H0.5毫克，純凈水1000毫升。

3.一種綠色巴夫藻三級養殖方法，其特征在于包括如下步驟：

第一階段，三角燒瓶培養；用3000-5000mL三角燒瓶培養，海水用脫脂棉過濾，煮沸消毒，按照權利要求1中綠色巴夫藻培養基配方順序和劑量依次添加培養基配方，室內培養，空調控溫，25±1℃；日光燈管照明，光強3000-6000lx，光/暗周期為16L/8D；藻液體積占瓶體積的3/5，取對數生長期藻種接種；滅菌的報紙和橡皮筋封口，接種密度25×10⁴cell/mL，不充氣，每天搖瓶6次，藻細胞密度達400×10⁴-600×10⁴cell/mL即轉入下一階段培養。

第二階段，白塑料桶培養；培養用的白色塑料桶為市場售常用聚乙烯塑料桶，圓筒形，直徑30cm，高60cm，加滿水約6.5×10⁴ml，消毒海水洗凈，再用蒸餾水潤洗3遍，桶口處用酒精擦洗消毒備用；白色塑料桶置于室外水泥地上，頂部有透明玻璃鋼瓦遮陰，四周開放式，將白桶放置于離地0.5m的水泥板上，自然光照射，最佳溫度25-30℃，最佳光照強度3000-6000lx；培養用海水采用漂白液(次氯酸鈉)氧化法消毒；氧化法消毒方法是1m³海水中加入漂白液200-300mL，使海水中有效氯含量達到10-20mg/L，充氣8-12h后，用硫代硫酸鈉中和余氯；硫代硫酸鈉量由余氯的多少來確定，直到滴入淀粉碘化鉀液不變色為止；藻種要選擇對數生長期藻種接種，即生長良好、生活力旺盛、色澤鮮艷、無沉淀及無明顯附壁現象的藻種，鏡檢無其它雜藻、原生動物等；接種在上午8:00-10:00進行；接種密度為50×10⁴cell/mL，氣泵充入空氣，充氣量不宜太大，以藻細胞浮起不下沉即可，充氣管末端連一氣石；夜間停止充氣，白天行間隔充氣，即充氣1小時，停1小時，重復進行；用透明薄膜蓋于桶上部，然后用橡皮筋拉緊，進行封閉式培養；經過5-7天的培養，密度達600×10⁴-800×10⁴cell/mL即轉入下一級培養。

第三階段，塑料薄膜袋培養；采用長度450厘米、周長200厘米的農用聚乙烯透明塑料薄膜袋，兩頭分別用紗布扎口；一端扎入1根充氣管，末端連2個散氣石；塑料袋另一端扎入一根長約20厘米，直徑6厘米的聚乙烯硬管，作為出氣管，此袋即為培養藻的容器；將此袋漂浮在盛有普通海水的水泥池中，水泥池長×寬×深＝600厘米×400厘米×85厘米，塑料袋兩端扎好后，用繩吊起，以防袋口沉入水中，向袋中注入0.8～1.4立方米的培養基并接入藻種，即可進行培養；每池吊袋6-8個；培養用的海水鹽度20-28‰，用次氯酸鈉消毒法消毒，方法同第二階段；加入上述營養鹽，選純種的對數生長期藻種接種，接種密度100×10⁴cell/mL，室外培養，自然光照射，溫度20-30℃，光強3000-6000lx為最佳，充入空氣，充氣方法同第二階段；培養4-6天，密度達600×10⁴-800×10⁴cell/mL即可采收。