[發明專利]SNX家族新基因及其用途

無效

• 申請號: 201210299799.X
• 申請日: 2012-08-21
• 公開（公告）號: CN102827265A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 舒曉東;裴端卿;劉勁松;蘇鐘;徐進新;吳斌;張雷
• 申請（專利權）人: 中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C12N15/12;C12N15/63;C12N5/10;C12N15/85;A61K38/17;A61K48/00;A61P1/04;C12N5/071;A01K67/027;A61K45/00;A61P33/06;C12Q1/02
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，尤其是，本發明涉及SNX11基因及其用途。

背景技術

內涵體是真核細胞內部眾多獨立的膜泡結構，分布于整個細胞質之中，負責在細胞不同部位之間的物質轉運，對細胞內物質轉運意義重大。一旦內涵體轉運出現混亂，就會影響細胞的正常生理進程，例如內涵體負責的信號分子受體轉運障礙會導致細胞增殖，分化失控等。Sorting?Nexins(SNXs)是對內涵體進行精細調控的蛋白家族，這個家族發現的比較晚，在人(Homo?sapiens)中共有33個成員，都具有PX結構域(phox-homology?domain)作為這一家族的特征結構域。

目前對于SNX家族的研究仍有待改進。

發明內容

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。

在本發明的第一方面，本發明提出了一種分離的多肽。根據本發明的實施例，該多肽具有SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列。

發明人經過分析，該多肽在SNX家族進化樹上與SNX10最為接近，二者PX結構域的相似性為78％，為此將該多肽在本文中命名為SNX11。發明人發現，在哺乳動物細胞中表達SNX11后發現它不產生和SNX10相似的成泡現象。而當發明人將SNX10和SNX11共轉染到細胞中時，發明人發現SNX11可以顯著的抑制SNX10誘導的成泡現象。另外，發明人發現SNX11抑制了晚期內涵體的異常擴大和成熟，但對Rab7的募集不產生影響。

進一步，發明人發現，通過表達SNX11可以抑制VacA在細胞中的空泡化作用。發明人發現在VacA處理后的細胞中，出現大量的擴大的晚期內涵體。當細胞轉染表達根據本發明實施例的多肽SNX11后，雖然Rab7依然出現聚集現象，但晚期內涵體的進一步擴大則被抑制。

另外，發明人建立了SNX11基因敲除小鼠，發現與野生型對照組相比，SNX11缺陷鼠可顯著抑制瘧原蟲的增殖，并有較高比率的小鼠存活，來自SNX11缺陷鼠的脾臟細胞在體外表現出更強的細胞增殖反應和分泌與抗瘧疾免疫力相關的白介素12(IL-12)和γ干擾素，表明瘧疾感染在SNX11缺陷鼠中可誘導更強的免疫反應。瘧原蟲感染后檢測血清特異性抗體水平顯示，SNX11小鼠產生了高水平的抗瘧疾抗體。SNX11基因表達水平分析表明，該基因在腦組織中表達豐富；在主要免疫細胞(CD4T細胞、CD8T細胞B細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、中性粒細胞和自然殺傷細胞)中，SNX11都有表達，其中，SNX11基因在中性粒細胞中表達最高，而且在瘧原蟲感染后，該基因表達在所分析的上述主要免疫細胞中均有顯著下降。

在本發明的第二方面，本發明提出了一種分離的寡核苷酸。根據本發明的實施例，該寡核苷酸能夠編碼前面所述的多肽。根據本發明實施例的寡核苷酸能夠編碼前面所述的多肽，由此，可以有效地實現體外表達本發明所分離的多肽，并且適于大規模表達分離所述的多肽。根據本發明的實施例，所述寡核苷酸具有如SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列。由此，可以進一步提高表達根據本發明實施例的多肽的效率。

在本發明的第三方面，本發明提出了一種表達載體。根據本發明的實施例，該表達載體包含編碼前面所述分離的多肽的核酸分子。由此，利用該表達載體，能夠有效地在體外表達體系例如重組細胞中，表達根據本發明實施例的多肽。

在本發明的第四方面，本發明提出了一種重組細胞。根據本發明的實施例，所述重組細胞中包含前面所述多肽的核酸分子，優選地包含如SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列，任選地所述細胞為動物細胞，優選非人哺乳動物細胞，更優選嚙齒類動物細胞，最優選小鼠細胞。

在本發明的第五方面，本發明提出了前面所述的多肽、寡核苷酸、或者表達載體在制備藥物中的用途。根據本發明的實施例，該藥物可以用于下列至少之一：治療胃潰瘍、抑制V-ATPase活性和抑制SNX10造成的晚期內涵體的異常擴大。

在本發明的第六方面，本發明提出了一種制備前面所述重組細胞的方法。根據本發明的實施例，該方法包括：使用前面所述的表達載體轉化宿主細胞；以及分離重組細胞，任選地所述宿主細胞為動物細胞，優選非人哺乳動物細胞，更優選嚙齒類動物細胞，最優選小鼠細胞。利用該方法，能夠有效地獲得根據本發明實施例所述的重組細胞。