[發明專利]注射用核糖核酸Ⅱ一種質量控制方法

有效

• 申請號: 201210295478.2
• 申請日: 2012-08-17
• 公開（公告）號: CN102818867A
• 公開（公告）日: 2012-12-12
• 發明（設計）人: 高其品;徐多多;高陽;李秉安;刁桂芳
• 申請（專利權）人: 吉林敖東藥業集團延吉股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/36
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.鑒定或輔助鑒定注射用核糖核酸Ⅱ的方法，包括如下步驟：

（1）將待測物質的核酸酶水解溶液進行高效液相色譜分析；所述高效液相色譜分析中采用的色譜條件如下：色譜柱為Agilent?ZORBAX?SB-AQ?C₁₈色譜柱，流動相為如下流動相A和流動相B，依次采用所述流動相A和所述流動相B進行洗脫；

流動相A：甲酸水溶液；

流動相B：體積比為80：20的甲酸水溶液與乙腈水溶液的混合溶液；

（2）按照如下方法確定所述待測物質是否為注射用核糖核酸Ⅱ：若步驟（1）高效液相色譜分析確定所述待測物質含有胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鳥嘌呤核苷酸、鳥嘌呤核苷和腺嘌呤核苷5種物質，則所述待測物質為注射用核糖核酸Ⅱ或候選為注射用核糖核酸Ⅱ；若經步驟（1）高效液相色譜分析后，確定所述待測物質不含有胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鳥嘌呤核苷酸、鳥嘌呤核苷和腺嘌呤核苷5種物質，則所述待測物質不為注射用核糖核酸Ⅱ注射用核糖核酸Ⅱ。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述流動相中，所述甲酸水溶液中甲酸的含量為每1000ml所述甲酸水溶液中含有1g所述甲酸；所述乙腈水溶液中乙腈的含量為每100ml所述乙腈水溶液中含有5g所述乙腈。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法中，所述流動相A洗脫10min后采用所述流動相B進行洗脫。

4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述待測物質的核酸酶水解溶液的獲得方法包括如下步驟：將所述待測物質與所述核酸酶按照質量比為5：1的比例溶解于水中，得到所述待測物質的核酸酶水解溶液。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述待測物質的核酸酶水解溶液的獲得方法還包括將所述待測物質與所述核酸酶按照質量比為5：1的比例溶解于水中后，進行60℃溫育的步驟。

6.根據權利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述進行高效液相色譜分析的檢測波長為260nm，進樣量為5～20μl，流速為1ml/min。

7.根據權利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于：所述方法中，通過高效液相色譜分析所述待測物質中是否含有胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鳥嘌呤核苷酸、鳥嘌呤核苷和腺嘌呤核苷5種物質的方法如下：

若經過高效液相色譜分析獲得的色譜圖，具有6個特征峰，且所述6個特征峰的相對保留時間在各自規定值±5%范圍之內，則所述待測物質中含有或候選含有胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鳥嘌呤核苷酸、鳥嘌呤核苷和腺嘌呤核苷5種物質；反之，則所述待測物質中不含有胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、鳥嘌呤核苷酸、鳥嘌呤核苷和腺嘌呤核苷5種物質；

所述6個特征峰的相對保留時間的所述規定值按照保留時間從小到達的順序依次為0.450-0.497、0.592-0.654、0.844-0.933、1、2.550-2.818、2.909-3.215。

8.根據權利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于：所述方法還包括如下步驟：將權利要求1中對所述待測物質進行高效液相色譜分析得到的待測物質色譜圖，與相同條件下對注射用核糖核酸Ⅱ標準品進行高效液相色譜分析得到的標準品色譜圖進行比對，若所述待測物質色譜圖與所述標準品色譜圖一致，則所述待測物質為注射用核糖核酸Ⅱ或候選為注射用核糖核酸Ⅱ，若所述待測物質色譜圖與所述標準品色譜圖不一致，則所述待測物質不為注射用核糖核酸Ⅱ；

所述注射用核糖核酸Ⅱ標準品的批準文號為國藥準字H22020007、國藥準字H20056530或國藥準字H22020006。

9.根據權利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于：所述方法還包括比較權利要求8所述待測物質色譜圖和所述標準品色譜圖，確定兩者指紋圖譜相似度的步驟。