[發明專利]一種前白蛋白檢測試劑盒及其制備方法

無效

• 申請號: 201210292025.4
• 申請日: 2012-08-16
• 公開（公告）號: CN102788881A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 謝兵
• 申請（專利權）人: 北京恩濟和生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體地說涉及一種檢測人前白蛋白的檢測試劑盒。

背景技術

血清前白蛋白（PA）是由4個相同亞基組成的四聚體，分子量為55.0kD。具有重要的生理活性。它與甲狀腺素結合球蛋白（TBG）和白蛋白一起，協同參與甲狀腺素的轉運。

PA在甲狀腺激素運輸中的作用僅次于TBG。TBG負責轉運甲狀腺素總量的70%～75%，PA則轉運15%～20%，而ALB轉運的甲狀腺素更少些（10%）。在正常生理條件下，血漿甲狀腺素幾乎全部（99.98%）通過與這三種蛋白質結合運轉，到達靶細胞。

PA的另一重要功能是協助視黃醇結合蛋白（RBP）轉運視黃醇。當機體需要維生素A時，貯存在肝臟內的視黃醇酯被水解，游離的視黃醇與RBP結合，被分泌到血循環中，再與PA結合，所形成的視黃醇RBP-PA大分子結合物，通過循環轉運到有特異性RBP受體結合部位的靶組織中，一進入靶細胞，視黃醇-RBP-PA結合物即分離。

急性、亞急性重癥肝炎起病后一周內，PA的下降變化遠較ALB敏感。各型肝炎患者血清PA水平均有不同程度的降低，以肝硬化和重癥肝炎降低最顯著。因此，血清中的PA?可作為中毒肝病的早期診斷指標和觀察肝臟功能恢復的靈敏指標。

前白蛋白測定方法很多，包括：(一)放射免疫測定法(RIA)、(二)酶聯免疫測定法(ELISA)、(三)乳膠凝集試驗和免疫比濁法、(四)?熒光免疫測定法。這些方法具有操作繁瑣、耗時長、過度浪費資源的缺點，不適于常規檢驗。

發明內容

本發明的目的是提供一種前白蛋白的檢測試劑盒。該試劑盒可直接應用于全自動生化分析儀上，結果準確性強、試劑穩定性好、使用方便、便于大規模推廣。

本發明的另一目的是提供上述檢測試劑盒的生產制備及使用方法。

為實現上述目的，本發明提供的試劑盒組成為：

試劑R1：緩沖液、聚乙二醇、疊氮鈉、乙二胺四乙酸鈉、牛血清白蛋白；

試劑R2：緩沖液、結合有前白蛋白單克隆抗體的乳膠粒子、吐溫-20、疊氮鈉、乙二胺四乙酸鈉、牛血清白蛋白。

本發明提供的上述試劑盒的制備方法及操做步驟如下：

（a）按下列比例配制好試劑：

試劑R1：

Tris緩沖液??????200-220mmol/L

聚乙二醇????????5-10?mmol/L

疊氮鈉??????????1-5?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??1-5mmol/L

牛血清白蛋白????1-5mmol/L；

試劑R2：

Tris緩沖液??????200-220mmol/L

結合有前白蛋白單克隆抗體的乳膠粒子???3.5-5%（v/v）

吐溫-20?????????1-5mmol/L

疊氮鈉??????????0.5-3?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??1-5mmol/L

牛血清白蛋白????1-5mmol/L；

（b）將試劑與待測樣本按一定比例混合，使其完全反應；

（c）用半/全自動生化分析儀測定吸光度變化值；

（d）根據吸光度變化值計算出樣本中前白蛋白的濃度。

具體實施方式

下述實施例是為了更詳細的解釋本發明，但不應理解為本發明局限于此。

實施例1：

本發明的試劑盒舉例是雙試劑，其中：

試劑R1：

Tris緩沖液??????200mmol/L

聚乙二醇????????8?mmol/L

疊氮鈉??????????5?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??5mmol/L

牛血清白蛋白????5mmol/L；

試劑R2：

Tris緩沖液??????200mmol/L

結合有前白蛋白單克隆抗體的乳膠粒子???5%（v/v）

吐溫-20?????????5mmol/L

疊氮鈉??????????3?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??5mmol/L

牛血清白蛋白????5mmol/L。

實施例2：試劑盒使用方法。

1.試劑準備，試劑為液體雙試劑，開瓶即用，其中：

試劑R1：

Tris緩沖液??????200mmol/L