[發明專利]用于檢測人MTHFR基因多態性的引物、探針、熒光PCR試劑盒和方法

有效

• 申請號: 201210291107.7
• 申請日: 2012-08-16
• 公開（公告）號: CN102808026A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 何曉輝;王薛;王進;陳允斌
• 申請（專利權）人: 蘇州曠遠生物分子技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;G01N21/64
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 汪旭東

1.?一種用于檢測人MTHFR基因多態性的檢測引物及其相應探針，其特征在于所述檢測引物及探針根據MTHFR基因c.665位點(C/T)多態性設計，序列如下所示：

反向引物：

MTHFR?665C:?5’-AGCTGCGTGATGATGAAATTGG-3’；

MTHFR?665T:?5’-AGCTGCGTGATGATGAAATTGA-3’；

正向引物：

MTHFR?665F:?5’-TGTGCTGTGCTGTTGGAAGGTG-3’

熒光探針：

TM-MTHFR?665:?5’熒光基團-TCAGAGCCCCCAAAGCAGAGGACTC-3’淬滅基團。

2.?一種用于檢測MTHFR基因多態性的檢測引物及其相應探針，其特征在于所述檢測引物及探針根據MTHFR基因c.1286位點(A/C)多態性設計，序列如下所示：

正向引物：

MTHFR?1286A:?5’-GAGGAGCTGACCAGTGATGA-3’；

MTHFR?1286C:?5’-GAGGAGCTGACCAGTGATGC-3’；

反向引物：

MTHFR?1286R:?5’-TGCCATGTCCACAGCATGGA-3’；

熒光探針：

TM-MTHFR?1286:?5’熒光基團-TCACAGCCCCGCAGCCTGGCCTGCAGCT-3’淬滅基團。

3.?一種用于檢測人MTHFR基因多態性的內控引物對及相應熒光探針，其特征在于所述內控引物對及相應熒光探針的序列如下所示：

內控引物對：

正向引物：GAPDH?F:?5’-CGCCCTCTTAATGGGGAGGTGG-3’；

反向引物：GAPDH?R:?5’-CTTTGGGGCTCACCATGTAGCACT-3’；

內控熒光探針：

TM-GAPDH:?5’熒光基團-TGTTGCCATCAATGACCCCTTC-3’淬滅基團。

4.如權利要求1-3所述的引物對及相應熒光探針，其特征在于所述熒光探針5’端的熒光基團為FAM、TET、VIC、HEX或ROX，3’端的淬滅基團為BHQ?-1、BHQ?-2、Dabcyl、Eclipse、或TAMRA。

5.?一種用于檢測人MTHFR基因多態性的試劑盒，其特征在于所述試劑盒包括權利要求1所述的檢測引物及其相應探針和/或括權利要求2所述的檢測引物及其相應探針。

6.?如權利要求5所述的檢測人MTHFR基因多態性的試劑盒，其特征在于所述試劑盒還包括如權利要求3所述內控引物對及相應熒光探針。

7.一種人MTHFR基因多態性的檢測方法，所述方法包括使用權利要求1和/或權利要求2所述的引物及探針。

8.如權利要求7所述的人MTHFR基因多態性的檢測方法，其特征在于所述方法包括使用權利要求3所述的引物及探針。

9.一種人MTHFR基因多態性的檢測方法，所述方法包括使用權利要求5-6所述的試劑盒。

10.權利要求1-3所述的引物及探針在檢測人MTHFR基因多態性中的應用。