[發明專利]一種抗菌劑及其制備方法

無效

• 申請號: 201210275946.X
• 申請日: 2012-08-06
• 公開（公告）號: CN102787138A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 朱姍穎;曹青;何華綱;王文兵
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12N15/866
• 分類號: C12N15/866;A61K39/12;A61P31/04
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.?一種含有ctl基因、Pie1啟動子的中間載體pFastBac-Pie1-ctl，其特征在于，它的結構如圖2所示，它通過下述步驟構建得到：

（1）根據苜蓿尺蠖核型多角體病毒的ctl基因設計引物，以苜蓿尺蠖核型多角體病毒基因組DNA作為模板進行PCR擴增，經瓊脂糖凝膠電泳及膠回收后，將ctl基因連入pMD18-T，形成含有ctl基因的重組質粒pMD18-T-ctl；

（2）利用SnaBI和BamHI將家蠶核型多角體病毒的Pie1啟動子取代pFastBac1上原有的多角體基因啟動子，得到pFastBac1-Pie1；用BamHI和KpnI切割重組質粒pMD18-T-ctl，回收ctl基因片段，克隆到pFastBac1-Pie1，構建含有ctl基因的中間載體pFastBac-Pie1-ctl。

2.一種抗菌劑，其特征在于通過下述步驟制得：

（1）將權利要求1所述中間載體pFastBac-Pie1-ctl轉化含桿粒DNA的大腸桿菌DH10B菌株，經轉座后，通過藍白斑篩選含有重組桿粒的大腸桿菌，提取含ctl基因的重組桿粒DNA；用脂質體轉染試劑將所述的重組桿粒DNA轉染離體培養的昆蟲細胞，收集含有ctl基因的重組病毒BV粒子的細胞培養液，作為重組病毒的種子液；

（2）以病毒種子液感染大量培養的昆蟲細胞，感染3~5天后，離心收集細胞培養物的上清液，得到抗菌劑。