[發明專利]降膽固醇菌粉，含有該菌粉的降膽固醇復合調味醬及其應用

有效

• 申請號: 201210274882.1
• 申請日: 2012-08-03
• 公開（公告）號: CN103005382A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 王靜
• 申請（專利權）人: 瀘州靠得住食品有限公司
• 主分類號: A23L1/24
• 分類號: A23L1/24;A23L1/29;C12N1/16;C12R1/88
• 代理公司: 泰和泰律師事務所 51219
• 代理人: 魏常巍

1.一種降膽固醇菌粉，其特征在于：所述的降膽固醇菌粉含有莫格球擬酵母（Torulopsis?mogii）新菌種LZKDZ?2011，所述的莫格球擬酵母新菌種LZKDZ?2011已于2012年7月30日保藏于中國典型培養物保藏中心（CCTCC），保藏號為CCTCC?M?2012303。

2.根據權利要求1所述的一種降膽固醇菌粉的制備方法，其特征在于：所述的制備方法包括下述步驟：

（1）制備液體富集培養基：按照重量份組成：蛋白胨10份，牛肉膏3份，氯化鈉5份，蒸餾水1000份稱取各原料，將稱取的蛋白胨、牛肉膏和氯化鈉溶解于蒸餾水中，校正PH值為7±0.2，在98KPa，121℃的條件下高壓滅菌15min得到液體富集培養基；

（2）富集培養：從自然發酵的蔬果中進行無菌采樣，稱取樣品1g加入盛有玻璃珠和100ml無菌水的錐形瓶中，震蕩20min，以10%的接種量接入100ml液體富集培養基中，在30℃，200rpm的條件下搖床培養20小時得到富集培養液；

（3）稀釋富集培養液：各量取富集培養液10ml，分別加入90ml、900ml等體積按10倍放大的液體富集培養基中制得4～8個不同稀釋度的富集培養稀釋液；

（4）制備固體篩選培養基平板：按照重量份組成：膽固醇2份，磷酸二氫鉀1.6份，硫酸鎂0.2份，硫酸錳0.2份，硝酸銨0.2份，氯化鈉5份，表面活性劑1份，瓊脂20份稱取各原料，將稱取好的原料除瓊脂外全部溶解于蒸餾水中，校正PH值為7±0.2，加入稱取好的瓊脂，加熱至瓊脂充分溶解、液體呈半透明狀時，分裝于錐形瓶中，在98KPa，121℃的條件下高壓滅菌15min得到固體篩選培養基平板；

（5）分離純化單菌株：將4～8個不同稀釋度的富集培養稀釋液分別涂布到每個固體篩選培養基平板上，在30℃溫度下倒置培養18h后，挑去不同菌落形態的菌株進行平板劃線分離，得到純化的單菌株；

（6）篩選菌株：測定從4～8個不同稀釋度的富集培養稀釋液分離純化得到的單菌株所產生的膽固醇氧化酶的活性高低，篩選出膽固醇氧化酶活性高的菌株；

（7）保藏菌株：按照固體篩選培養基平板的制備方法在15×150的試管中制備固體斜面培養基，將篩選出的菌株接種在固體斜面培養基上，待菌株生長至菌落數為10¹⁵～10¹⁶個／cm²，封閉試管開口，將試管在2～8℃的溫度條件下冷凍保藏；

（8）制備液體種子活化培養液：從保藏菌株的試管中挑取一環接入100mL液體富集培養基中，在30℃，200rpm的條件下搖床培養24小時得到菌株菌落數10⁸～10⁹個／ml的液體種子活化培養液；

（9）制備發酵培養基：按照重量份組成：麥芽粉300份，蒸餾水1000份稱取各原料，將稱取的麥芽粉加入蒸餾水中加熱至38℃保溫2h，再升溫至45℃保溫30min，再提高到50℃保溫30min，再升至60℃，糖化1～1.5h得到糖化液，糖化完畢后將糖化液加熱至100℃煮半小時，然后將加熱后的糖化液過濾得到澄清液，該澄清液即是發酵培養基；

（10）發酵液培養：按5%的接種量將液體種子活化培養液接入發酵培養基中，在30℃，200rpm的條件下搖床培養48h得到發酵液；

（11）制備降膽固醇菌粉：將發酵液置于-18±4℃的溫度下冷凍18～24小時，冷凍后放入真空干燥冷凍機，在1.3～13帕的真空狀態下，在-25～-40℃的溫度條件下冷凍干燥3～4小時至發酵液中90%的水分充分干燥得到發酵塊，發酵塊粉碎即得降膽固醇菌粉。

3.根據權利要求2所述的一種降膽固醇菌粉的制備方法，其特征在于：所述的第（2）步驟富集培養中無菌采樣的自然發酵蔬果為發酵白菜、酸辣椒、蘋果、菠蘿、桔子中的一種或幾種。

4.一種含有權利要求1所述的降膽固醇菌粉的降膽固醇復合調味醬，其特征在于：包括下述重量份組成的原料：

小麥麥芽550-600份，食鹽300-350份，降膽固醇菌粉5.6-6.6份，香辛料粉75-120份和水500-600份。