[發明專利]一種雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法

無效

• 申請號: 201210272503.5
• 申請日: 2012-07-31
• 公開（公告）號: CN102743751A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 吳紅云;徐進;哈斯通拉嘎;郭俊清
• 申請（專利權）人: 鄭州后羿制藥有限公司
• 主分類號: A61K39/42
• 分類號: A61K39/42;A61K9/19;A61P31/14
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

1.一種雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：先通過制備出免疫性強的毒株制成疫苗，并制備高免蛋，經過消毒、酸化處理、辛酸處理、精制提取凈化處理、配制、凍干得到二聯卵黃抗體凍干粉。

2.根據權利要求1所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

1）選出標準毒株制成疫苗，采用每間隔5天對選定的健康雞群免疫，新城疫抗體與法氏囊抗體交替進行，第二次免疫后開始抗體效價檢測，新城疫抗體效價達1：256、法氏囊抗體效價達1：512時，開始收集高免蛋；

2）收集的高免蛋進行清理、消毒，晾干備用；

3）分離高免卵黃，加入等體積的無菌水，攪拌混勻，直到顏色發白為止，得到充分混勻卵黃溶液；

4）步驟3)得到的卵黃溶液放入水浴鍋內加熱30min，然后加入pH為4.9-5.2的預冷酸化水溶液，混勻，靜置沉淀，取上清液，離心20min，15000rpm/min，留上清液；

5）向步驟4）上清液中加入0.8-1.0%體積的辛酸，混勻，靜置，棄去雜質漂浮物；

6）將步驟5）得到上清液離心10min，20000rpm/min，留取上清液，靜置，再用0.45μm的濾膜進行過濾，除去較大的雜質或者雜蛋白，得到卵黃抗體溶液；

7）采用超濾裝置進行超濾濃縮，濃縮到已定好的體積和抗體效價為止；

8）將濃縮好的卵黃溶液加入滅活劑和防腐劑；

9）加入輔料；

10）制定出合理的凍干曲線，凍出完整的卵黃抗體凍干粉。

3.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：步驟3）所述無菌水的加入量與卵黃溶液等體積。

4.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：步驟4）中的采用鹽酸配制的酸化水pH為4.9-5.2，預冷于溫度為4-6℃，時間為1-2h，加入量為未稀釋卵黃液體積的6倍。

5.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：步驟4）中卵黃溶液加熱溫度為60-65℃，時間30min，要間斷性攪拌。

6.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：步驟6）所述第一次過濾要求的濾膜孔徑為0.45μm。

7.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：將步驟7）中超濾裝置的濾膜孔徑為截流分子量大于30-100KD的卵黃抗體溶液。

8.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：步驟8）所述的防腐劑為硫柳汞，硫柳汞為0.01-0.02%。

9.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：步驟9）所述的輔料為葡萄糖、山梨醇、甘氨酸或甘露醇中的一種或任意組合。

10.根據權利要求2所述的雞新城疫、傳染性法氏囊病二聯高免卵黃抗體凍干粉的制備方法，其特征在于：凍干曲線程序：-40℃開始升華，2h后升到-35℃保持14h。