[發明專利]一種利用熒光強度檢測硝基呋喃代謝物的方法

有效

• 申請號: 201210268701.4
• 申請日: 2012-07-30
• 公開（公告）號: CN102759519A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發明（設計）人: 賈東芬;王亞軍
• 申請（專利權）人: 六角體科技（天津）有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及食品安全檢測領域，尤其涉及一種利用熒光強度檢測硝基呋喃代謝物的方法。

背景技術

目前，國內外已建立的檢測方法主要采用了液相色譜-質譜聯用法（GB/T?21311-2007）和酶聯免疫法。以上兩種均存在前處理時間長，提取操作繁瑣、費時等缺點。在檢測方面，酶聯免疫法主要用于快速篩選，但檢測方法單一，只能分別檢測一次待測物，檢測設備雖比較便宜，但檢測試劑昂貴。

《中華人民共和國國家標準農業部1077號公告-2-2008》“水產品中硝基呋喃類代謝物殘留量-高效液相色譜法”?采用了新型衍生劑與SPE柱提取凈化技術，與現有的國標相比，衍生化時間由不少于16小時縮短到1個小時，提取凈化由2小時縮短到0.5小時,整體檢測時間由20小時縮短為2小時。新的方法突出了新的機理，前處理過程簡化掉原有標準中難控制的衍生化酸度調節和繁瑣的提取凈化操作。方法準確、可靠，靈敏度高，且大幅度降低檢測成本（時間、儀器、試劑），總體技術達到了國際先進水平。該標準已在08年8月在水產行業成功推廣使用，對硝基呋喃代謝物的控制起到了積極的推進作用。

對于全國范圍的大規模監控檢測來說，使用上述幾種方法是可行的。但其中仍然存在不足。(1)目前各地的檢測條件還不完全統一，具有液相色譜-串聯質譜儀、液相色譜儀的實驗室很少，原因是這些儀器都很昂貴，需要進行大量的投資才可行；（2）樣品處理和檢測周期過長，不能對源頭及時監控，無法滿足大量的硝基呋喃代謝物普查工作的需求。因此，行業內急需一種無需大型精密儀器、價格低廉，并且能夠快速便捷的現場檢測方法，來彌補此領域的技術空白。

發明內容

為解決上述中存在的問題與缺陷，本發明提供了一種利用熒光強度檢測硝基呋喃代謝物的方法。所述技術方案如下：

一種利用熒光強度檢測硝基呋喃代謝物的方法，包括：?

A?通過提取劑提取樣品，并將提取的樣品通過上清液進行液化；

B?將液化后的樣液進行衍生化，得到衍生化樣液；

C?將衍生化樣液通過萃取柱進行萃取及洗脫劑的洗脫，得到洗脫液；

D?通過萃取劑對洗脫液進行萃取，得到萃取后的萃取液；

E?吸取下層萃取液于點滴板一孔上，在該孔上加入定性試劑并混合均勻，形成待測樣品混合液；

F?吸取對照液或陰性樣液于點滴板對照孔上；

G?將點滴板置入硝代速測儀中，通過待測樣品混合液的熒光強度與對照液或陰性樣液的熒光強度判斷所述待測樣品中含有的硝基呋喃類代謝物的含量。

本發明提供的技術方案的有益效果是：

具有操作簡便、成本低廉、可現場判定結果的特點。可滿足農業、質檢、工商、衛生、檢驗檢疫等食品安全監管部門的現場監督檢查需要，對畜禽及水產品養殖、生產與經營企業控制產品質量也有重要意義。

附圖說明

圖1是利用熒光強度檢測硝基呋喃代謝物的方法流程圖。

具體實施方式

為使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將結合附圖對本發明實施方式作進一步地詳細描述：

本實施例提供了一種用熒光強度檢測硝基呋喃代謝物方法，所述方法包括：

步驟10?通過提取劑提取樣品，并將提取的樣品通過上清液進行液化；

步驟20?將液化后的樣液進行衍生化，得到衍生化樣液；

步驟30?將衍生化樣液通過萃取柱進行萃取及洗脫劑的洗脫，得到洗脫液；

步驟40?通過萃取劑對洗脫液進行萃取，得到萃取后的萃取液；

步驟50?吸取下層萃取液于點滴板一孔上，在該孔上加入定性試劑并混合均勻，形成待測樣品混合液；

步驟60?吸取對照液或陰性樣液于點滴板對照孔上；

步驟70?將點滴板置入硝代速測儀中，通過待測樣品混合液的熒光強度與對照液或陰性樣液的熒光強度判斷所述待測樣品中含有的硝基呋喃類代謝物的含量。

其上述方法具體檢測步驟如下：

提?。悍Q取已絞碎或勻質的樣品10g與50mL的離心管中，倒入一瓶固體提取劑和一瓶液體提取劑，振搖1分鐘使樣品完全分散開與提取劑充分接觸后，在37～40℃條件下超聲提取15分鐘取出，振搖約1分鐘后，過濾或離心，取上清液10mL于另一支50mL的離心管中。

上述過濾過程為：取一塊脫脂棉，塞住漏斗上頸口，加3mL凈化劑潤洗脫脂棉，用一次性吸管吸取10mL樣液過濾并收集。

上述離心是在5000r/min離心5分鐘后，取上清液10mL。