[發明專利]一種制備高純度低分子肝素鈉的工藝

有效

• 申請號: 201210265494.7
• 申請日: 2012-07-30
• 公開（公告）號: CN102775523A
• 公開（公告）日: 2012-11-14
• 發明（設計）人: 胡永紅;沈飛;于輝;李棟蕓;馮旌;李佼佼;楊文革
• 申請（專利權）人: 南京新百藥業有限公司;南京工業大學
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;袁正英

1.一種制備高純度低分子肝素鈉的工藝，其具體步驟如下：

（1）將粗品肝素鈉溶于NaCl溶液中，機械攪拌至肝素鈉全部溶解，向溶液中加入堿液直至產生沉淀，靜置，過濾除去不溶物，得濾液；

（2）將步驟（1）中濾液以堿液調pH至9.5～10.5，加入H₂O₂溶液，在10～30℃下反應2.5～3.5小時，得反應液；

（3）將步驟（2）得到的反應液升溫至30～50℃，此后每隔2.5～3.5小時補加H₂O₂溶液，并調節pH；補料后共反應15～21h；

（4）向步驟（3）得到的反應液中加入吸附劑，磁力攪拌，過濾除不溶物，得濾液；

（5）將步驟（4）中的濾液通過平衡好的凝膠色譜柱，收集低分子量的肝素鈉洗脫液；

（6）將步驟（5）中的低分子量的肝素鈉洗脫液用弱堿性離子交換樹脂吸附，分別以三種濃度的NaCl溶液洗脫，收集第一種（最低）、第三種（最高）濃度的NaCl洗脫液并混合；

（7）將步驟（6）中的混合洗脫液，在磁力攪拌下降溫至－5～8℃，再用乙醇沉淀、真空干燥得產品。

2.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（1）中NaCl溶液的質量百分濃度為1.2～1.8%；NaCl溶液的用量為2～3mL/g肝素鈉粗品量；靜置時間1～2小時。

3.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（1）和（2）的堿液均為NaOH或KOH溶液；堿液的濃度為1～1.5mol/L。

4.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（2）和（3）中所加入的H₂O₂溶液和NaCl溶液的體積比為3～5：100；步驟（2）中H₂O₂溶液的濃度為1～5mol/L，步驟（3）中H₂O₂溶液的濃度為1～3mol/L。

5.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（3）中每次補加完H₂O₂溶液后測定pH，使pH在6.8～7.5之間。

6.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（4）中所述的吸附劑為活性碳、皂土或硅酸鹽；吸附劑的加入量為3～5g/100mlNaCl溶液量。

7.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（5）中所述的凝膠色譜柱為Sephadex?G-25，樣品層為15～25%柱床體積，柱的徑/高為1：5～7；以質量百分濃度4～6%NaCl溶液平衡并洗脫，流速為一個柱床體積/1.5～2小時，收集60～90mim時的洗脫液。

8.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（6）中三種濃度的NaCl溶液分別為0.1～0.3g/L、0.4～0.6g/L、0.7～0.9g/L；其洗脫時間均為1.8～2.5小時，樣品層為15～25%柱床體積。

9.根據權利要求1所述的工藝，其特征在于：步驟（6）中所用的弱堿性離子交換樹脂是D301、D315、D318或330，柱的高/徑比為6～8：1。