[發明專利]一種制備漿細胞的方法及其得到的漿細胞

有效

• 申請號: 201210262858.6
• 申請日: 2012-07-26
• 公開（公告）號: CN102807994A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 江小霞;毛寧
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: C12N15/867
• 分類號: C12N15/867;C12N5/10
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種用B細胞制備漿細胞的方法，依次包括如下步驟：

（1）干擾離體的B細胞中MYSM1基因的表達；所述MYSM1基因為編碼序列表的序列1所示蛋白質的基因；

（2）采用脂多糖誘導細胞分化為漿細胞。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述“干擾B細胞中MYSM1基因的表達”的實現方式如下：在所述離體的B細胞中導入抑制所述MYSM1基因表達的物質。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于：所述“抑制所述MYSM1基因表達的物質”為表達針對所述MYSM1基因的shRNA的重組慢病毒。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于：所述“在所述離體的B細胞中導入抑制所述MYSM1基因表達的物質”的實現方式如下：將所述重組慢病毒與所述離體的B細胞共培養。

5.如權利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述重組慢病毒的制備方法包括如下步驟：將重組質粒甲、質粒pMDLg/pRRE、質粒pRSV-Rev和質粒pMD2.G共轉染哺乳動物細胞，培養細胞后得到重組慢病毒；所述重組質粒甲為含有DNA片段甲的質粒；所述DNA片段甲編碼的RNA為具有沉默所述MYSM1基因的功能的shRNA。

6.如權利要求3或4或5所述的方法，其特征在于：所述重組慢病毒的感染劑量為MOI=5。

7.如權利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：進行所述共培養時，加入輔助病毒感染的試劑。

8.如權利要求1至7中任一所述的方法，其特征在于：所述步驟（2）中，所述誘導細胞分化的時間為2-4天。

9.如權利要求1至8中任一所述的方法，其特征在于：所述離體的B細胞為離體的小鼠B細胞。

10.權利要求1至9中任一所述方法制備得到的漿細胞。