[發(fā)明專利]用于檢測BMPR2基因突變的引物組、該引物組的用途及包含該引物組的試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210255515.7
• 申請日: 2012-07-23
• 公開（公告）號: CN102965430A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 盧文菊;張晨婷;王健
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10
• 代理公司: 廣州知友專利商標(biāo)代理有限公司 44104
• 代理人: 宣國華;馬赟齋

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及引物，具體涉及用于檢測BMPR2基因突變的引物組，本發(fā)明還涉及該引物組的用途，以及包含該引物組的試劑盒。

背景技術(shù)

肺動脈高壓是各種原因引起的靜息狀態(tài)下右心導(dǎo)管測得的肺動脈平均壓（mean?pulmonary?arterial?pressure，mPAP）≥25mmHg的一組臨床病理生理綜合征。肺動脈高壓可以作為一種疾病而獨立存在，更常見的是很多疾病進(jìn)展到一定階段的病理生理表現(xiàn)。由于肺血管重塑引起肺循環(huán)血流動力學(xué)改變，最終可導(dǎo)致右心衰竭，甚至死亡。這是一種極度惡性的疾病，七成多患者是年輕人，幾乎每個人都知道癌癥愈后差，但沒有人知道肺動脈高壓是一種極度惡性疾病，它的病因復(fù)雜、發(fā)病率高、誤診率高、危害性強(qiáng)，其愈后是災(zāi)難性的，可以說，這種病就是心血管疾病中的癌癥。這種疾病平均發(fā)病年齡是36歲，75%患者集中于20-40歲年齡段，還有15%患者年齡在20歲以下，幾歲的孩子也會發(fā)病。世界上該病的發(fā)病率在1×10^-5～1×10^-6之間，其中約6%為家族性的。多數(shù)家族性肺動脈高壓和超過26%的散發(fā)病例都伴有骨形成蛋白Ⅱ型受體基因（Bone?morphogenetic?protein?receptorⅡgene，BMPR2）序列改變。BMPR2存在大量不同的突變，但其臨床表現(xiàn)和病理學(xué)特征與散發(fā)例完全一致。因此采用DNA檢測尋找BMPR2基因突變有助于識別家系中高風(fēng)險的成員，以及未出生孩子的患病風(fēng)險，這對提高人口素質(zhì)，優(yōu)生優(yōu)育有重要的意義。對于散發(fā)性病人進(jìn)行BMPR2基因突變檢測，對指導(dǎo)用藥，基因評估具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一是提供一種用于檢測BMPR2基因突變的引物組。

BMPR2基因第1到第13外顯子區(qū)、3’UTR、5’UTR和啟動子中的任一區(qū)域在結(jié)構(gòu)上發(fā)生堿基對組成或排列順序的改變，都視為BMPR2基因發(fā)生了突變。因而，根據(jù)BMPR2基因第1至第13外顯子區(qū)、3’UTR、5’UTR和啟動子分別設(shè)計出能專一性鑒別BMPR2基因是否突變的特異性引物組，可通過PCR擴(kuò)增和測序測定BMPR2基因上述區(qū)域是否發(fā)生改變，以鑒定BMPR2基因是否發(fā)生突變，因此，本發(fā)明的用于檢測BMPR2基因突變的引物組可以是BMPR2基因第1至第13外顯子區(qū)、3’UTR、5’UTR和啟動子中任一區(qū)域?qū)?yīng)的引物組。

本發(fā)明第一個目的提供的用于檢測BMPR2基因突變的引物組，包括BMPR2基因第1到第13外顯子區(qū)，3’UTR、5’UTR和啟動子中任一區(qū)域?qū)?yīng)的PCR擴(kuò)增引物組，即選自BMPR2基因第1到第13外顯子區(qū)、3’UTR、5’UTR和啟動子分別對應(yīng)的PCR擴(kuò)增引物組，具體地，所述引物組選自BMPR2基因的第1外顯子區(qū)(Exon1)的PCR擴(kuò)增引物組、第2外顯子區(qū)(Exon2)的PCR擴(kuò)增引物組、第3外顯子區(qū)(Exon3)的PCR擴(kuò)增引物組、第4外顯子區(qū)(Exon4)的PCR擴(kuò)增引物組、第5外顯子區(qū)(Exon5)的PCR擴(kuò)增引物組、第6外顯子區(qū)(Exon6)的PCR擴(kuò)增引物組、第7外顯子區(qū)(Exon7)的PCR擴(kuò)增引物組、第8外顯子區(qū)(Exon8)的PCR擴(kuò)增引物組、第9外顯子區(qū)(Exon9)的PCR擴(kuò)增引物組、第10外顯子區(qū)(Exon10)的PCR擴(kuò)增引物組、第11外顯子區(qū)(Exon11)的PCR擴(kuò)增引物組、第12外顯子區(qū)(Exon12)的PCR擴(kuò)增引物組、第13外顯子區(qū)(Exon13)的PCR擴(kuò)增引物組、3’UTR的PCR擴(kuò)增引物組、5’UTR的PCR擴(kuò)增引物組和啟動子的PCR擴(kuò)增引物組中的任意一組，所述的上述各PCR擴(kuò)增引物組為表1所示。

表1：BMPR2基因PCR擴(kuò)增引物序列

本發(fā)明所述的引物組還包括BMPR2基因第1到第13外顯子區(qū)、3’UTR、5’UTR和啟動子中任一區(qū)域?qū)?yīng)的PCR測序引物組，具體地，所述引物組包括選自BMPR2基因第1到第13外顯子區(qū)、3’UTR、5’UTR和啟動子分別對應(yīng)的PCR測序引物組中的任意一組。

本發(fā)明所述的PCR測序引物組如表2所示。

表2：BMPR2基因PCR測序引物序列

本發(fā)明的第二個目的是提供使用上述PCR擴(kuò)增引物組在制備通過PCR擴(kuò)增自生物樣品獲得核酸樣品檢測BMPR2基因是否突變的試劑中的用途。