[發明專利]一種細菌生物膜研究模型

無效

• 申請號: 201210222025.7
• 申請日: 2012-06-29
• 公開（公告）號: CN103509781A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 馬小軍;宋慧一;于煒婷
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12N11/08;C12N11/04;C12Q1/02;C12R1/19;C12R1/385;C12R1/225;C12R1/07;C12R1/445;C12R1/46
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.一種細菌生物膜研究模型，其特征在于：

由包埋有細菌的海藻酸鹽-聚陽離子絡合微膠囊形成，并培養得到，微膠囊內細菌菌體增殖后即表現出細菌生物膜特點。

2.按照權利要求1所述的細菌生物膜研究模型，其特征在于：微膠囊內包埋的細菌是任何可以產生生物膜的一種或二種以上細菌；其為大腸桿菌（Escherichia?Coli）、綠膿桿菌（Pseudomonasaeruginosa）、乳酸桿菌（Lactobacillus?lactis）、蘇云金芽孢桿菌（Bacillus?thuringiensis）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）、嗜熱鏈球菌（Streptococcus?thermophilus）等相關細菌菌株。

3.按照權利要求1或2所述細菌生物膜研究模型，其特征在于：該模型的制備方法如下：

A：按10⁶-10⁸CFU/mL海藻酸鈉溶液的初始接種量將細菌細胞混懸在0.1-50g/L海藻酸鈉溶液中，制備包埋細菌細胞的海藻酸鹽微球，稱之為A微球；

B：將上述A微球浸入質量濃度0.1-10％殼聚糖或聚賴氨酸的聚陽離子溶液中，微球與聚陽離子溶液體積比為1:1-1:40，反應1-60分鐘，此時得到海藻酸鈉-聚陽離子微膠囊；取出用生理鹽水洗滌2-3次，稱之為B微球；

C：將B微球浸入有機金屬螯合劑溶液中，液化微膠囊內部的海藻酸鹽凝膠；參與液化反應的有機金屬螯合劑溶液為40-70mmol/L的檸檬酸鈉或50-200mmol/L的EDTA溶液；B微球與有機金屬螯合劑溶液體積比范圍為1:1-1:40，反應1-60分鐘，取出用生理鹽水洗滌，此時得到內部液態核心的微膠囊，稱之為C微球；

D：將B微球或C微球按照5-15％的體積接種到相應于可用于細菌細胞培養的培養基中，培養至細菌細胞為1×10⁹-1×10¹²細胞/毫升微球時結束培養。

4.按照權利要求3所述細菌生物膜研究模型，其特征在于：

所述聚陽離子溶液為質量濃度0.1-10％殼聚糖溶液或質量濃度0.1-10％聚賴氨酸溶液。

5.按照權利要求3所述細菌生物膜研究模型，其特征在于：包埋細菌細胞的海藻酸鹽微球的制備方法可采用靜電液滴法、銳孔擠出法、乳化-外部凝膠化法、乳化-內部凝膠化法或膜乳化法。

6.按照權利要求3所述細菌生物膜研究模型，其特征在于：

細菌細胞培養基種類、培養溫度及培養時間依據所選定的細菌細胞確定。

7.一種權利要求1所述的生物膜模型，其特征在于：該模型可用于細菌生物膜的形成過程、細胞生物膜的特異基因表達及相關信號系統的研究。