[發明專利]一種微生物轉化苯甲酰甲酸甲酯制備(S)-(+)-扁桃酸甲酯的方法

有效

• 申請號: 201210213446.3
• 申請日: 2012-06-21
• 公開（公告）號: CN102719497A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發明（設計）人: 歐志敏;南穎康;嚴琴英;李仁瑋
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12P7/62
• 分類號: C12P7/62;C12N11/10;C12N11/04;C12R1/865
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

1.一種微生物轉化苯甲酰甲酸甲酯制備(S)-(+)-扁桃酸甲酯的方法，所述方法包括：以苯甲酰甲酸甲酯為底物，以釀酒酵母（Saccharomyces?cerevisiae）CGMCC?No.2230在發酵獲得的含酶菌體細胞為生物催化劑，在鄰苯二甲酸二丁酯中，于20~35℃下進行轉化反應8~96小時，轉化液經分離純化得到所述(S)-(+)-扁桃酸甲酯；在鄰苯二甲酸二丁酯中底物苯甲酰甲酸甲酯的初始濃度為1~300mmol/L。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述含酶菌體細胞經固定化之后作為生物催化劑，其用量為：每L鄰苯二甲酸二丁酯中含有的生物催化劑相當于以包埋法將1.0~4.0g的含酶菌體細胞固定化后再經增殖培養16~72小時獲得的固定化細胞顆粒。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于所述生物催化劑制備方法如下：將釀酒酵母菌株CGMCC?No.2230發酵培養獲得的菌體濃度為3.0~10.0g/L的發酵液與等體積質量濃度1~5%的海藻酸鈉溶液混合，攪拌均勻得到混合液，將混合液逐滴滴入質量濃度為2.5~4.0%的氯化鈣溶液中，連續攪拌得到固定化懸浮液，放置于35~38℃條件下固化，得到的固定化顆粒用無菌生理鹽水洗滌后，分散于發酵培養基中進行增殖培養16~72h獲得增殖培養后的固定化細胞顆粒，即為生物催化劑。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于所述發酵培養基組成如下：葡萄糖26~32g/L，酵母粉2~4g/L，硫酸銨3~6g/L，無水MgSO₄0.2~0.4g/L，K₂HPO₄·3H₂00.5~1.5g/L，KH₂PO₄0.6~1.5g/L，pH自然，溶劑為水。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述分離純化方法如下：反應結束后，將轉化液過濾除去生物催化劑，將轉化液減壓蒸餾，收集餾分經過硅膠柱層析分離，獲得產物(S)-(+)-扁桃酸甲酯。