[發(fā)明專利]一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210213429.X
• 申請(qǐng)日: 2012-06-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102726293A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-10-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃麗云;周煥起;范海闊;李杰;劉立云
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院椰子研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 海口翔翔專利事務(wù)有限公司 46001
• 代理人: 莫臻

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物細(xì)胞工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種棕櫚科植物的資源離體保存方法，尤其是一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法。

背景技術(shù)

檳榔(Areca?catechu??L.)屬棕櫚科檳榔屬植物，是我國(guó)熱帶地區(qū)主要的經(jīng)濟(jì)作物及熱帶園林綠化樹(shù)種，也是我國(guó)重要的南藥資源之一，被列為四大南藥之首，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。在亞州及太平洋地區(qū)，檳榔果主要用作當(dāng)?shù)厝罕姷木捉朗群闷罚瑱壚圃耘嘁阎饾u向商品化、規(guī)模化發(fā)展。檳榔在我國(guó)主要分布在海南省,?總產(chǎn)量占大陸檳榔產(chǎn)量的99%以上。目前在海南的種植面積已達(dá)103萬(wàn)畝，產(chǎn)量達(dá)14.36萬(wàn)噸，鮮果年產(chǎn)值20億元以上，加工產(chǎn)值達(dá)50～60億元，是海南東部、中部和南部地區(qū)近200萬(wàn)農(nóng)民主要的經(jīng)濟(jì)來(lái)源。

組織培養(yǎng)是植物快速繁殖最有效的方法，胚培養(yǎng)作為種質(zhì)資源保存繁殖的重要手段已被廣泛應(yīng)用，利用胚培養(yǎng)獲得的胚培苗不僅運(yùn)輸成本低，還可避免在種質(zhì)交換過(guò)程中的病蟲(chóng)害傳播，利用胚或胚培苗作為種質(zhì)保存可以解決大田保存占地面積大、費(fèi)用高等問(wèn)題。

檳榔為單桿棕櫚科植物，常規(guī)的營(yíng)養(yǎng)繁殖方法如扦插、嫁接、高空壓條等不適用于檳榔繁殖，而主要靠種子繁殖，但該方法容易傳播病蟲(chóng)害。至目前為止，在國(guó)內(nèi)外檳榔組織培養(yǎng)雖有報(bào)道，但尚未建立較為完善的培養(yǎng)體系，檳榔組織培養(yǎng)快繁技術(shù)研究還處于起步階段。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法，通過(guò)在保存培養(yǎng)基中提高糖用量可很好地延緩植株的生長(zhǎng)速度，有利于國(guó)內(nèi)外種質(zhì)資源的交換，避免在種質(zhì)交換過(guò)程中發(fā)生病蟲(chóng)害傳播，同時(shí)還可解決大田保存占地面積大、費(fèi)用高等問(wèn)題，為離體快繁技術(shù)提供理論支撐，對(duì)檳榔種質(zhì)資源收集保存以及種苗的工廠化生產(chǎn)提供一條有效途徑。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案：

一種檳榔種質(zhì)資源離體保存的方法，其步驟如下：

1、選取15年樹(shù)齡以上的種質(zhì)資源結(jié)果樹(shù)，采集7～8個(gè)月的檳榔種果，切除大部分果皮和胚乳，留取包裹著完整胚的胚乳塊；將胚乳塊洗凈后消毒，置于滅菌濾紙上吸干水分，然后取出胚。

2、將胚置于預(yù)培養(yǎng)基中培養(yǎng)40～50天，待胚萌發(fā)形成芽和莖，生根培養(yǎng)形成完整植株，在植株生長(zhǎng)至1.5～2cm高度時(shí)即進(jìn)行離體保存。所述預(yù)培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加AC?1g/L、蔗糖50?g/L。

3、將檳榔1.5～2cm高的植株轉(zhuǎn)接入保存培養(yǎng)基中保存培養(yǎng)，即可實(shí)現(xiàn)檳榔種質(zhì)資源離體保存。所述保存培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加BA??2mg/L、NAA??0.5mg/L、蔗糖120g/L、AC??1g/L、瓊脂?8g/L。

本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，通過(guò)在保存培養(yǎng)基中提高糖用量可很好地延緩檳榔植株的生長(zhǎng)速度，其生長(zhǎng)期比未使用保存培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)接培養(yǎng)長(zhǎng)6～8個(gè)月，有利于種質(zhì)資源的保存，有利于國(guó)內(nèi)外種質(zhì)資源的交換，避免在種質(zhì)交換過(guò)程中發(fā)生病蟲(chóng)害傳播，同時(shí)還可解決大田保存占地面積大、費(fèi)用高等問(wèn)題，為離體快繁技術(shù)提供理論支撐，對(duì)檳榔種質(zhì)資源收集保存以及種苗的工廠化生產(chǎn)提供一條有效途徑。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例一

1、胚的獲得及預(yù)培養(yǎng)

選取15年樹(shù)齡以上的種質(zhì)資源結(jié)果樹(shù)進(jìn)行跟蹤調(diào)查，確定目標(biāo)株后從雌花受粉后開(kāi)始到果實(shí)7-8個(gè)月時(shí)及時(shí)采收（檳榔胚的成熟度影響胚的萌發(fā)率，胚成熟度高則出苗率也高，檳榔種果一般成熟時(shí)間為12個(gè)月，但12個(gè)月的檳榔種果不利于種胚的獲取，由于在成熟時(shí)胚乳堅(jiān)硬如石，不易取胚，一般在7-8個(gè)月時(shí)種胚容易獲取且易培養(yǎng)）。收集后先把種果用流水沖洗，切除果皮后留有包被著胚的胚乳塊，大小約為2×2cm，留含胚的胚乳塊經(jīng)自來(lái)水洗凈后，再用70%的酒精表面消毒30S，再以0.1%的升汞溶液消毒8min，最后用無(wú)菌水沖洗3～5次。將洗凈的胚乳塊置滅菌濾紙上吸干水分，用解剖刀取出嫩種胚置于預(yù)培養(yǎng)基中培養(yǎng)40～50天，待胚萌發(fā)形成芽和莖，生根培養(yǎng)形成完整植株，在植株生長(zhǎng)至1.5～2cm高度時(shí)即進(jìn)行離體保存，（先消毒再取胚可防止滅菌液直接接觸胚對(duì)胚體造成傷害，影響后期胚萌發(fā)及生長(zhǎng)發(fā)育）。預(yù)培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加AC?1g/L、蔗糖50?g/L。

2、保存培養(yǎng)