[發明專利]一種腫瘤用藥個體化指導的檢測方法

有效

• 申請號: 201210206583.4
• 申請日: 2012-06-21
• 公開（公告）號: CN102994627B
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 吳勇;李令棟;南麗;顏進;王晴晴
• 申請（專利權）人: 寧波海爾施基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種腫瘤用藥個體化指導的多重基因檢測試劑盒，其特征在于包括：反轉錄緩 沖液、反轉錄引物管、反轉錄酶、PCR緩沖液、PCR引物管、熒光標記物、25mM氯化 鎂、DNA聚合酶和陽性對照，反轉錄引物管和PCR引物管中的引物的具體核苷酸序列如 下表所示，

其中RT反應體系及反應條件：5-20ng/ul的核酸樣品RNA?5uL，DEPC水8uL，5×RT緩 沖液4uL，RT引物溶液2uL，RT酶1uL混勻后加入到96孔樣品板上進行反轉錄，反 應條件：48℃1分鐘；42℃60分鐘；95℃5分鐘；4℃直至收取RT產物；

PCR反應體系及反應條件：RT產物8.6uL，10×PCR緩沖液2uL，25mM的氯化鎂4 uL，PCR引物溶液2uL，DNA聚合酶1.4uL混勻后加入到96孔樣品板上進行PCR反應，反 應條件：95℃10分鐘；94℃30秒鐘，60℃30秒鐘，70℃1分鐘，循環34次；70℃1 分鐘；4℃直至收取PCR產物。