[發明專利]一種輸血前配合試驗的試劑組及其試驗方法

有效

• 申請號: 201210200505.3
• 申請日: 2012-06-18
• 公開（公告）號: CN103424555A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 林媽利;詹詠絮
• 申請（專利權）人: 林媽利;詹詠絮
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80;G01N33/50
• 代理公司: 北京銀龍知識產權代理有限公司 11243
• 代理人: 鐘晶;於毓楨

技術領域

本發明為一種輸血前配合試驗的試劑組及其試驗方法，特別是一種能改善傳統手工凝聚胺法檢測靈敏度的試劑組及其試驗方法。?

背景技術

血型是對血液分類的方法，是一種遺傳的特征，臨床上所說的血型是指紅血球表面抗原構造的差異。從廣義來說，血型包括紅血球、白血球、血小板、血漿等血液成分不同的抗原系統。人類最早認識的血型系統是ABO血型系統，例如：紅血球上含有A抗原便稱為A型；這是由奧地利維也納大學病理研究所的卡爾·蘭德施泰納(Karl?Landsteiner)于1900年發現，健康人的血漿對不同人類個體的紅血球有凝聚作用，因而建立了ABO血型系統。之后，新的血型系統不斷被研究發現，并由1935年成立的國際輸血學會專門負責認定與命名工作。目前獲得承認的30種人類血型系統超過600種抗原，但其中大部分都非常罕見。?

血型系統對輸血具有重要意義，以不相容的血型輸血可能導致溶血反應的發生，造成溶血性貧血、腎衰竭、休克以至死亡。對于人類來說，雖然『ABO血型系統』和『Rh血型系統』在國際輸血協會承認的30種血型系統中是最重要的兩種，但是在臨床上并不是僅僅只有這兩種血型系統的不同血型間，才會有輸血不相容的反應發生，故病患必須在輸血之前，先在血庫作一系列檢查來選擇正確安全的血液，才能確保輸血的安全性。?

另外，一般在輸血前的有限時間內會執行所謂的交叉配血試驗，利用受血者血漿與供血者紅血球做配對，以檢測受血者的血漿中是否含有會與供血者的紅血球表面抗原發生表面抗原反應的未知抗體，或利用受血者紅血球與供血者血漿做配對，以檢測受血者的紅血球上是否存在會與供血者血漿中所含有的抗體發生凝集反應的未知表面抗原。因此，綜觀上述所言，所謂的『輸血前配合試驗』，包括有『ABO及Rh血型的鑒定』、『抗體的篩檢或鑒定』及『交叉配?血試驗』等三種。?

在習知上，亞洲國家一般都采用所謂的『手工凝聚胺法(Manual?Polybrene，簡稱MP法)』來執行輸血前配合試驗，其主要采用的凝聚胺(Polybrene)試劑，是一種多價陽離子氨基聚合物，它可以引起正常紅血球的可逆性凝集。在習知的手工凝聚胺法檢驗流程中，首先讓供血者紅血球和受血者血漿在低離子介質(low?ionic?medium，簡稱LIM)中使抗體與紅血球抗原結合，然后加入凝聚胺使紅血球發生可逆性凝聚，之后經過離心沉淀后，再加入檸檬酸鹽再懸浮溶液(檸檬酸根帶負電荷)中和凝聚胺正電荷，就可恢復紅血球表面的負電荷。此時，若紅血球是因凝聚胺試劑所造成的非特異性凝聚，當加入檸檬酸鹽再懸浮溶液后，紅血球表面會恢復負電荷，紅血球間隨即因互斥力而散開，結果為陰性反應；若紅血球是由于抗原抗體引起的特異性凝集，則不會受檸檬酸鹽再懸浮溶液的影響而散開，結果為陽性反應。?

然而，傳統手工凝聚胺法的檢測方法與試劑配方對抗體偵測靈敏度太高，通常對于不具有臨床意義的抗體的檢測結果（如：冷型抗體、非特異性抗體…）也為呈現陽性反應，這會加重后續抗體鑒定的工作量，不僅耗費時間，也可能造成病患面臨無適合血袋可用的窘境，故這對于當病患急需用血時，將產生很大的危險性。因此，發展一種僅對有臨床意義的抗體具有很高的偵測靈敏度，但卻對不具臨床意義的抗體有較低的偵測靈敏度的試劑配方或檢驗方法，實有其必要性。?

另外，影響傳統手工凝聚胺法準確度的關鍵在于血漿(或血清)與血球的比例要大于50倍，低于50倍則偵測靈敏度不佳；一般來說，傳統手工凝聚胺試管法的比值約為66.67倍(即100μL：1.5μL)。然，上述已提過除了『ABO血型系統』和『Rh血型系統』兩大血型必須確認外，尚還有其他的血型系統也會有產生輸血不相容的反應，因此，若要在進一步的作更詳盡的抗體篩檢或鑒定，就必需要抽取病患更多的血液檢體，這對于一個缺血的病患而言，無疑是雪上加霜。因此，假使檢測時只需微量樣本液體，將其血漿(或血清)與血球的比例提升到遠大于50倍，甚或100倍以上，即可獲得高準確性的檢測結果，對于病患而言無非是一大福音。?

未來若能再結合自動化、平行大量檢測的設備與方法，將可節省檢測時間?與人力，降低檢測成本，同時又能達到檢驗作業流程標準化的目標。?

發明內容

本發明提供一種用于輸血前配合試驗的試劑組，可以改善傳統手工凝聚胺法檢測靈敏度，該試劑組包含血球清洗液、低離子介質溶液、凝聚胺溶液及再懸浮溶液。?