[發明專利]一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑

有效

• 申請號: 201210189180.3
• 申請日: 2012-06-08
• 公開（公告）號: CN102692411A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 李子樵;孫明禮
• 申請（專利權）人: 上海藍怡科技有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 何新平

1.一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：由以下物質組成，

（a）從血液樣品中的紅細胞釋放血紅蛋白的溶解緩沖劑；

（b）能夠切斷糖化血紅蛋白β鏈N基末端的糖化纈氨酸或糖化多肽片段的蛋白酶；

（c）能夠氧化并消除樣本中干擾物質的氧化劑；

（d）能夠將血紅蛋白變性并且能夠加快蛋白酶反應速率的氧化劑；

（e）能夠加快蛋白酶反應速率的加速反應劑；

（f）與物質a中能夠切斷糖化血紅蛋白β鏈N基末端的糖化纈氨酸或糖化多肽片段進行氧化還原反應的果糖基氨基酸氧化酶；

（g）能夠與產生的過氧化氫發生顯色反應的顯色劑；

（h）能夠催化過氧化氫和顯色劑發生顯色反應的過氧化物酶。

2.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述物質a中的緩沖劑為TritonX-100、Tween-20、Brij35中的一種；添加的濃度為0.1%-1%的重量，室溫下靜置3-10分鐘即可溶血完全。

3.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述物質b中的蛋白酶為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、蛋白酶K、豬胰蛋白酶、氨肽酶、嗜熱菌蛋白酶、蛋白酶E、中性蛋白酶、彈性蛋白酶中的一種；蛋白酶的濃度范圍為100-5000KU/L。

4.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述物質c中的氧化劑是戴斯馬丁氧化劑或者高碘酸鈉，其濃度范圍為0.5-10mmol/L。

5.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述的物質d中的氧化劑為四唑鎓鹽。

6.根據權利要求5所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述的四唑鎓鹽是2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑鹽、2-（4-碘苯基）-3-（2，4-二硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑鹽、2-（2-甲氧基-4-硝基苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑鹽、2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-苯基-2H-四唑鹽、2，5-二苯基-3-（間甲苯基）四唑鹽、2，5-二苯基-3-（對甲苯基）四唑鹽、2，3-二苯基-5-（2-噻吩基）四唑鹽、鐵氰化鉀、碘酸鉀。其中優選2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑鹽、2-（4-碘苯基）-3-（2，4-二硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯基）-2H-四唑鹽中的一種，其濃度范圍為0.05-10mmol/L。

7.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述物質e中的加速反應劑為葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麥芽糖、正十二烷基-β-D-麥芽糖、亞硝酸鉀、亞硝酸鈉、硝基苯中的一種或多種混合物，其濃度范圍為0.01-1mmol/L。

8.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述物質f中果糖基氨基酸氧化酶是純化的或是重組產生的。

9.根據權利要求8所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述果糖基氨基酸氧化酶為作用于a-氨基被糖化的氨基酸或肽，同時催化產生過氧化氫的酶，其濃度為0.2-100KU/L。

10.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述物質h中的過氧化物酶為辣根過氧化物酶，其濃度范圍為20-800KU/L。

11.根據權利要求1所述的一種測定糖化血紅蛋白百分比的試劑，其特征在于：所述物質g中的顯色劑為N-（羧甲基氨基羰基）-4，4’-雙（二甲氨基）二苯基胺鈉（DA-64）、10-（羧甲基氨基羰基）-3，7-雙（二甲氨基）吩噻嗪鹽（DA-67）、Trinder試劑中的一種，其濃度范圍為0.02-10mmol/L。