[發明專利]一種短肽、載銅納米生物材料及在制備治療下肢缺血性疾病的藥物中的應用

有效

• 申請號: 201210188770.4
• 申請日: 2012-06-08
• 公開（公告）號: CN103467577A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 唐成康;康裕建
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;A61K38/16;A61P9/10;A61K33/34
• 代理公司: 成都科海專利事務有限責任公司 51202
• 代理人: 黃幼陵;馬新民

技術領域

本發明屬于生物材料領域，特別涉及自組裝短肽、含自組裝短肽的載銅納米生物材料及其在制備治療下肢缺血性疾病的藥物中的應用。

背景技術

自組裝短肽是一種新型的納米生物材料，自20世紀90年代問世以來，受到了人們的廣泛重視，得到了快速的發展，并在細胞三維培養及制備疏水藥物載體、止血藥物、燒傷治療藥物、抑菌藥物、白血病治療或預防藥物等方面應用。但是，制備出更多的自組裝短肽、擴大自組裝短肽的應用范圍仍然是科技工作者關注的問題。

下肢缺血性疾病是一種世界范圍內常見的下肢動脈慢性狹窄或閉塞導致的外周血管病，下肢缺血性疾病主要包括下肢動脈硬化閉塞癥(ASO)、血栓閉塞性脈管炎(TAO)和糖尿病動脈硬化閉塞癥(DAO)。下肢缺血性疾病往往由于病側主要動脈嚴重閉塞，造成遠端供血障礙，其最終結局往往是截肢甚至死亡。下肢缺血性疾病發病率都在逐年急速上升。據統計，在西方國家最新的重度下肢缺血(Critical?limb?ischemia,?CLI)的發病率為500-1000/百萬人/年，在美國每年病例數量為150000-300000。CLI第一年的死亡率和發病率超過了惡性腫瘤，死亡率為25%，截肢率為30%。在我國，現有下肢缺血病人2000萬以上，年增長高達60萬。近年來，隨著引起血管疾病危險因素的增多，如高血脂、高血壓、糖尿病等疾病發病人數的急速增加以及老齡化時代的到來，下肢缺血性疾病已逐漸凸顯出嚴重的危害程度和發病率逐年增高的趨勢，面對如此嚴峻形勢，如何減少患者的致殘率、挽救已瀕于截肢的病人肢體，是醫療領域急需解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種自組裝短肽和含自組裝短肽的載銅納米生物材料，本發明的再一目的是證明載銅納米生物材料能使病變組織器官的血管新生，以便開發出一類治療下肢缺血性疾病的新型藥物。

本發明所述自組裝短肽，命名為RP，其氨基酸序列為序列表中SEQ?ID?NO：1所述，其理論分子量為3066.15道爾頓。本發明所述載銅納米生物材料，為上述RP自組裝短肽、RAD16-II自組裝短肽、CuSO₄和滅菌去離子水配制成的混合溶液所形成的凝膠狀物質，所述混合溶液中，RP自組裝短肽的濃度為0.1mM～4mM，RAD16-II自組裝短肽的濃度為2mM～~8mM、CuSO₄的濃度為10μM～100μM，所述RAD16-II自組裝短肽已公開?[見Shuguang?Zhang.?Designer?self-assembling?peptide?nanofiber?scaffolds?for?3D?tissue?cell?cultures.?Seminars?in?Cancer?Biology?15?(2005)?413–420]?，其氨基酸序列為序列表中SEQ?ID?NO：2所述。本發明所述載銅納米生物材料，其制備方法如下：

（1）去離子水的滅菌處理

將去離子水在蒸汽壓103.4kPa、溫度121.3℃下處理至少30分鐘，然后冷卻至室溫；

（2）原料溶液的配制

在室溫、常壓下將CuSO₄用步驟（1）滅菌處理的去離子水配制成CuSO₄溶液，然后在超凈臺的無菌環境中將CuSO₄溶液用0.22μm的一次性濾器過濾除菌，所述CuSO₄溶液中，CuSO₄的濃度是上述形成凝膠狀物質的混合液中的CuSO₄濃度的2倍~4倍；

在超凈臺的無菌環境中于室溫、常壓下將RP自組裝短肽用步驟（1）滅菌處理的去離子水配制成RP自組裝短肽溶液，所述RP自組裝短肽的氨基酸序列為序列表中SEQ?ID?NO：1所述，所述RP自組裝短肽溶液中，RP自組裝短肽的濃度是上述形成凝膠狀物質的混合液中的RP自組裝短肽濃度的2倍~4倍；

在超凈臺的無菌環境中于室溫、常壓下將RAD16-II自組裝短肽用步驟（1）滅菌處理的去離子水配制成RAD16-II自組裝短肽溶液，所述RAD16-II自組裝短肽的氨基酸序列為序列表中SEQ?ID?NO：2所述，所述RAD16-II自組裝短肽溶液中，RAD16-II自組裝短肽的濃度是上述形成凝膠狀物質的混合液中的RAD16-II自組裝短肽濃度的2倍~4倍；

（3）混合液的配制