[發(fā)明專利]一種白囊耙齒菌發(fā)酵用液體培養(yǎng)基用添加劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210184224.3
• 申請(qǐng)日: 2012-06-06
• 公開（公告）號(hào): CN102690147A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 滕利榮;湯海峰;逯家輝;孟慶繁;權(quán)宇彤;王德利;邵妍;姜丹;孟令軍;孟威
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號(hào): C05G3/00
• 分類號(hào): C05G3/00
• 代理公司: 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明提供一種白囊耙齒菌發(fā)酵用液體培養(yǎng)基用添加劑，涉及白囊耙齒菌發(fā)酵液體培養(yǎng)基配方優(yōu)化，可有效提高液體發(fā)酵時(shí)菌絲體產(chǎn)量及部分有效成分含量，屬藥用真菌發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

白囊耙齒菌是一種具有很高的醫(yī)學(xué)價(jià)值的藥用真菌。在治療尿少，浮腫，腰痛，血壓升高等疾病方面具有很好的療效，是某些治療腎病藥物的主要原料來(lái)源。

隨著對(duì)白囊耙齒菌開發(fā)的不斷深入，先后還發(fā)現(xiàn)其在抗炎、調(diào)節(jié)免疫力，增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)功能，增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，促進(jìn)細(xì)胞因子產(chǎn)生，增強(qiáng)體液免疫反應(yīng)等方面具有顯著效果，因此該菌具有廣闊的應(yīng)用前景。

具文獻(xiàn)報(bào)道白囊耙齒菌中腺苷、多糖是其主要藥用成分。目前普遍采用的液體深層發(fā)酵方法獲得以上有效成分。培養(yǎng)基主要由葡糖糖、蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、微生素B1、乳糖、氯化鈉、氯化鈣、硝酸鉀、L-天冬素、磷酸氫二鈉、硫酸鐵、硫酸鋅、硫酸銅、硫酸錳等物質(zhì)組成。現(xiàn)有培養(yǎng)基發(fā)酵周期較長(zhǎng)，有效成分含量較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種白囊耙齒菌發(fā)酵用液體培養(yǎng)基用添加劑，可有效提高菌絲體產(chǎn)量及有效成分的含量，縮短了培養(yǎng)周期。

本發(fā)明還提供了含有上述添加劑的白囊耙齒菌深層發(fā)酵培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)白囊耙齒菌。

本發(fā)明的白囊耙齒菌發(fā)酵用液體培養(yǎng)基用添加劑，其特征在于每升培養(yǎng)基含有：

木質(zhì)素磺酸鈣?5～10g，天然冰片3～8g；

本發(fā)明添加劑在使用時(shí)，將白囊耙齒菌按5%體積比接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，再加入滅菌后的上述添加劑。

本發(fā)明提供的含有本發(fā)明添加劑的白囊耙齒菌培養(yǎng)基，其特征在于每升培養(yǎng)基中含有以下物質(zhì)：

葡糖糖?20g，蛋白胨10g，酵母浸粉?10g，磷酸二氫鉀?0.5g，硫酸鎂?0.5g，微生素B1?0.1g，木質(zhì)素磺酸鈣?5～10g，天然冰片3～8g，余量為水。

在現(xiàn)有廣泛培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，添加本發(fā)明添加劑，從而達(dá)到縮短液體深層發(fā)酵周期，提高菌絲體及多糖、腺苷產(chǎn)量。

本發(fā)明添加劑的使用方法：

取葡糖糖20g、蛋白胨10g、酵母浸粉10g、磷酸二氫鉀0.5g、硫酸鎂0.5g、微生素B1?0.1g加水至1升，分裝于250mL錐形瓶中，裝液量為每瓶100mL，121℃，滅菌20min。待培養(yǎng)基冷卻后按照無(wú)菌操作的方法將制備好的白囊耙齒菌懸液5mL加入培養(yǎng)基中，然后將滅菌后的添加劑加入培養(yǎng)基中，26℃，150轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)67小時(shí)。

添加劑的滅菌方法為干熱空氣滅菌法，即135-140℃滅菌3-5h或160-170℃滅菌2-4h或180-200℃滅菌0.5-1h。

提供對(duì)比試驗(yàn)表明：

與普通培養(yǎng)基相比，使用本發(fā)明的添加劑制備的培養(yǎng)基，對(duì)白囊耙齒菌培養(yǎng)后可以使菌絲干重提高5.3%～9.1%，使多糖含量提高7.5%～11.0%，使腺苷含量提高4.5%～8.2%。（見(jiàn)表一）

本發(fā)明的積極效果是：本發(fā)明向白囊耙齒菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基中加入木質(zhì)素磺酸鈣和天然冰片兩種化學(xué)物質(zhì)。該兩種物質(zhì)會(huì)在白囊耙齒菌生長(zhǎng)過(guò)程中提高細(xì)胞的運(yùn)輸效率、促進(jìn)菌體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收與利用，從而提高細(xì)胞代謝產(chǎn)物腺苷產(chǎn)量、多糖產(chǎn)量和菌絲干重。并通過(guò)正反饋調(diào)節(jié)等生物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用，促進(jìn)細(xì)胞代謝產(chǎn)物的積累，提高有效成分產(chǎn)量，縮短培養(yǎng)周期。本發(fā)明中天然冰片在高濃度（濃度高于15g/L）時(shí)具有抑菌效果，但在低濃度（濃度低于10g/L）時(shí)不影響細(xì)菌生長(zhǎng)并可與木質(zhì)素磺酸鈣產(chǎn)生協(xié)同作用發(fā)揮積極效果。在使用時(shí)天然冰片加入量不得高于10g/L。通過(guò)實(shí)驗(yàn)（見(jiàn)實(shí)施例）證明該兩種物質(zhì)確實(shí)提高了白囊耙齒菌發(fā)酵產(chǎn)物中多糖產(chǎn)量、腺苷產(chǎn)量和菌絲干重。

具體實(shí)施方式???????

實(shí)施例1：

取葡糖糖20g、蛋白胨10g、酵母浸粉10g、磷酸二氫鉀0.5g、硫酸鎂0.5g、微生素B1?0.1g加水至1升，分裝于250mL錐形瓶中，裝液量為每瓶100mL，121℃，滅菌20min。待培養(yǎng)基冷卻后按照無(wú)菌操作的方法將制備好的白囊耙齒菌懸液5mL加入培養(yǎng)基中，然后加入滅菌后的木質(zhì)素磺酸鈣8g，天然冰片5g，26℃，150轉(zhuǎn)/分鐘振蕩培養(yǎng)67小時(shí)。

實(shí)施例2：