[發明專利]一種香青蘭提取物及其指紋圖譜檢測方法

有效

• 申請號: 201210179993.4
• 申請日: 2012-06-01
• 公開（公告）號: CN102707003A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 李錚;劉洋;胡宇馳;潘艷麗;方敏;汪國鵬
• 申請（專利權）人: 北京市藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京市惠誠律師事務所 11353
• 代理人: 雷志剛;潘士霖

1.制備香青蘭提取物的方法，其包括以下步驟：將香青蘭藥材粉碎；加入藥材重量5-30倍的水提取30-90分鐘；再加入水體積1-3倍的95%乙醇繼續加熱回流提取30-90分鐘；提取液回收乙醇并濃縮、干燥，即得。

2.一種香青蘭提取物，其是基本上按照權利要求1所述的方法提取得到的。

3.用指紋圖譜方法檢測和評價香青蘭藥材或香青蘭提取物的方法，該方法包括如下步驟：

(a)取供測試的香青蘭藥材或供測試的香青蘭提取物，所述供測試的香青蘭藥材照本發明第一方面所述方法處理得到香青蘭提取物(由此獲得的香青蘭提取物或者前述供測試的香青蘭提取物，二者可稱為供試品，或者可稱為供試品提取物)；

(b)另取對照的香青蘭藥材或對照的香青蘭提取物，所述對照的香青蘭藥材照本發明第一方面所述方法處理得到香青蘭提取物(由此獲得的香青蘭提取物或者前述對照的香青蘭提取物，二者可稱為對照品，或者可稱為對照品提取物)；

(c)分別精密稱取供試品提取物和對照品提取物適量，用50-100倍體積的甲醇溶解，經0.45μm微孔濾膜過濾，濾液分別稱為供試品溶液和對照品溶液，用于高效液相色譜(HPLC)分析；

(d)高效液相色譜條件為：色譜柱為C₁₈色譜柱，流動相為0.1%的磷酸水溶液-乙腈；流速0.8~1.2ml/min；采用200-400nm波長紫外檢測記錄每一波長下成分響應值的方式檢測；梯度洗脫方式為：

(e)吸取步驟(c)的供試品溶液和對照品溶液，分別將其注入高效液相色譜中，照(d)項所述色譜條件進行洗脫，分別得到供試品HPLC圖和對照品HPLC圖；

(f)比較步驟(e)所得供試品HPLC圖和對照品HPLC圖。

4.用指紋圖譜方法檢測和評價香青蘭藥材或香青蘭提取物的方法，該方法包括如下步驟：

(i)取供測試的香青蘭藥材或供測試的香青蘭提取物，所述供測試的香青蘭藥材照本發明第一方面所述方法處理得到香青蘭提取物(由此獲得的香青蘭提取物或者前述供測試的香青蘭提取物，二者可稱為供試品，或者可稱為供試品提取物)；

(ii)另取對照的香青蘭藥材或對照的香青蘭提取物，所述對照的香青蘭藥材照本發明第一方面所述方法處理得到香青蘭提取物(由此獲得的香青蘭提取物或者前述對照的香青蘭提取物，二者可稱為對照品，或者可稱為對照品提取物)；

(iii)分別精密稱取供試品提取物和對照品提取物適量，用50-100倍體積的甲醇溶解，經0.45μm微孔濾膜過濾，濾液分別稱為供試品溶液和對照品溶液，用于高效液相色譜(HPLC)分析；

(iv)高效液相色譜條件為：色譜柱為C₁₈色譜柱，流動相為0.1%的磷酸水溶液-乙腈；流速0.8~1.2ml/min；采用200-400nm波長紫外檢測記錄每一波長下成分響應值的方式檢測；梯度洗脫方式為：

(v)吸取步驟(iii)的供試品溶液和對照品溶液，分別將其注入高效液相色譜中，照(iv)項所述色譜條件進行洗脫，分別得到供試品HPLC圖和對照品HPLC圖；

(vi)比較步驟(v)所得供試品HPLC圖和對照品HPLC圖；

(vii)使哺乳動物分別口服步驟(i)的供試品提取物或者步驟(ii)的對照品提取物，口服后0.5-10小時內取生物樣品，提取該生物樣品，得到生物供試品溶液(由步驟(i)的供試品提取物口服后獲得)或生物對照品溶液(由步驟(ii)的對照品提取物口服后獲得)；

(viii)吸取步驟(vii)的生物供試品溶液和生物對照品溶液，分別將其注入高效液相色譜中，照(iv)項所述色譜條件進行洗脫，分別得到生物供試品HPLC圖和生物對照品HPLC圖；

(ix)比較步驟(viii)所得生物供試品HPLC圖和生物對照品HPLC圖。