[發明專利]一種具有ACE抑制活性的plastein反應修飾肽的制備方法

無效

• 申請號: 201210179012.6
• 申請日: 2012-05-24
• 公開（公告）號: CN102690855A
• 公開（公告）日: 2012-09-26
• 發明（設計）人: 趙元暉;曾名湧;朱曉杰;沈晴晴;劉尊英;董士遠;劉偉航
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種具有ACE抑制活性的plastein反應修飾肽的制備方法。

背景技術

高血壓是引起心血管疾病的主要因素，與心血管疾病發生的危險性是正相關。血管緊張素轉換酶(ACE)在人體血壓調節過程中起重要作用，ACE抑制劑通過抑制血管緊張素I向血管緊張素II轉換，以及阻止ACE降解緩激肽而起到降血壓的作用。

由于化學合成的ACE抑制劑對人體健康存在潛在危害，如引發蛋白尿、白細胞減少、停藥綜合癥等，其應用必將受到越來越嚴格的限制，尋找安全高效的ACE抑制劑已成為當前醫學界面臨的主要課題。

大分子的蛋白質中存在著某些具有ACE抑制活性的肽片段，可以通過酶水解釋放出來。蛋白質酶解制備出的ACE抑制肽，其活性相比于蛋白質和氨基酸往往更為顯著。目前，利用不同來源蛋白質酶解制備具有ACE抑制活性肽的研究已被廣泛開展，先后從日本清酒、沙丁魚、蛋黃、酸奶、鰹魚等食品原料中獲得ACE抑制活性肽。然而，研究表明絕大多數蛋白質酶解肽的ACE抑制活性都較低，與同濃度化學合成的ACE抑制劑(卡托普利、依那普利等)的活性相差幾倍到幾百倍左右。因此，酶法制備ACE抑制肽的較低活性已成為其研究與開發的瓶頸。

類蛋白(plastein)反應是濃縮的蛋白水解物在合適條件下經蛋白酶作用形成凝膠狀物質的反應，它通常被認為是蛋白質水解反應的逆反應。plastein反應在改善多肽功能性和食物蛋白營養性方面顯示出巨大的潛力，而且在plastein反應中無需添加任何有機溶劑或化學試劑，一般具有較高的安全性，其必將成為食品工業的研究熱點。

plastein反應修飾是改善多肽ACE抑制活性的新途徑。

發明內容

本發明的目的是提供一種具有ACE抑制活性的plastein反應修飾肽的制備方法，以克服現有技術的不足。

本發明的技術方案：

海參和蒸餾水按1∶8-10g/ml的比例勻漿，漿液在45-50℃的溫度下攪拌6-8小時，離心得蛋白溶液；將蛋白溶液的pH值調為7.0后加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都為蛋白溶液中蛋白質量的1％，在50℃的溫度下酶解3-4小時；將上述所得酶解液濃縮至質量濃度為30％-40％后加入木瓜蛋白酶，加入量為酶解液中蛋白質量的1％，在40-55℃的溫度下plastein反應修飾1-2小時制得。

本發明以低值海參(茄參)為原料，利用plastein反應修飾制備一種高活性的ACE抑制肽，所得活性肽安全、無毒，在食品和藥品領域具有廣闊的應用前景。

具體實施方式

海參和蒸餾水按1∶8-10g/ml(最好是1∶10g/ml)的比例勻漿，漿液在45-50℃(最好是45℃)的溫度下攪拌6-8小時(最好是7小時)，離心得蛋白溶液；將蛋白溶液的pH值調為7.0后加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都為蛋白溶液中蛋白質量的1％，在50℃的溫度下酶解3-4小時(最好是4小時)；將上述所得酶解液濃縮至質量濃度為30％-40％(最好是35％)后加入木瓜蛋白酶，加入量為酶解液中蛋白質量的1％，在40-55℃(最好是45℃)的溫度下plastein反應修飾1-2小時(最好是1小時)制得。