[發明專利]彌漫性大B細胞淋巴瘤分子標記物檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 201210177077.7
• 申請日: 2012-05-31
• 公開（公告）號: CN102808019A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 杜祥;徐清華;周曉燕;倪淑娟;譚聰
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬腫瘤醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/68
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術領域

本發明屬生物學和醫學檢驗領域，涉及一組腫瘤分子標記物及其臨床應用。具體而言，涉及彌漫性大B細胞淋巴瘤的分子分型標記物、檢測方法及該檢測方法涉及的試劑盒。

背景技術

彌漫性大B細胞淋巴瘤（Diffuse?Large?B-Cell?Lymphoma，DLBCL）是目前最常見的成人非霍奇金淋巴瘤，是一種具有高侵襲性、生長迅速的腫瘤。占西方國家成人非霍奇金淋巴瘤的30％～40％¹。目前，我國非霍奇金淋巳瘤的發病率約為4/10萬，并以每年2-3%的速度增長，其中DLBCL最為常見，約占每年所有淋巳瘤的50%，因此，每年全國新發病例約為2-3萬。2008年WHO分類將DLBCL定義為：大的腫瘤性B淋巴細胞呈彌漫性生長，腫瘤細胞的核與正常組織細胞的核相近或大于組織細胞的核，細胞大小不小于正常淋巴細胞的兩倍²。研究表明DLBCL在病理形態學、免疫學表型、基因表達等方面均具有較高的異質性，越來越多的證據顯示其可能并不是一個真正獨立的病種。正是由于DLBCL具有顯著的生物學異質性，病人對治療的反應差異顯著，常規的CHOP聯合化療方案(環磷眈氨、阿霉素、長春新堿和潑泥松)只能使約40%的患者獲得長期緩解。隨著人鼠嵌合性抗CD20單克隆抗體(利妥昔單抗，Rituximab)聯合化療(R-CHOP)的應用，進一步提高DLBCL的臨床療效，但仍有30-40%的患者對治療無效或治療后迅速復發，疾病進展快，預后差。因此，研究DLBCL不同亞型的生物學特性，制定相應的治療方案成為目前DLBCL的研究熱點。當前評價DLBCL患者的預后主要依賴臨床參數，最常用的是國際預后指數(international?prognostic?index，IPI)，包括年齡、功能狀態、血清乳酸脫氫酶水平、累及結外部位的數量以及AnnArbor分期等5個臨床特征³。由于這種評價方式僅是一些臨床指標的結合，并不能很好地反映腫瘤發生過程中內在的分子生物學特征。因此，對相當一部分患者的預后不能進行準確評價，具有相同IPI值的患者治療后可能呈現完全不同的生存狀況，一些被分在低危、低中危組的病人5年生存率仍僅有32%。

近年來，基于基因表達譜的研究大大加深了對DLBCL的認識，也使在分子水平上對其進一步分類、診斷及預后判斷成為可能。2000年，Alizadeh等⁴首次使用基因芯片技術檢測DLBCL的基因表達圖譜，將腫瘤細胞依據基因表達模式的不同分為兩類：生發中心B細胞(germinal?center?B-cell)和活化的外周血B細胞(activated?B-cell)。由此將DLBCL分成兩型，I型顯示生發中心B細胞表達標記，即GCB-DLBCL；II型顯示活化的外周血B細胞表達標記，即ABC-DLBCL。隨后，Rosenwald等人在240例的大樣本研究中證實了上述結果⁵，并且提出了第三類腫瘤細胞的起源，此類腫瘤并不高表達上述兩種細胞的特征基因，將此型命名為第三型DLBCL，即Type3-DLBCL。但這部分患者是否是獨立的一型DLBCL還存在爭議，有待進一步的研究證明。國內外眾多的研究結果證實，DLBCL分子亞型是獨立于IPI的預后評價指標，針對各個亞型CHOP聯合化療方案的療效各不相同^4-6。生存分析顯示ABC和GCB五年生存率分別為31％和59％，GCB型生存率明顯好于ABC型。第三型預后情況與ABC型相似。參照DLBCL基因表達譜分型的結果，一些研究組利用組織芯片(TMA)以及免疫組化(IHC)等方法區分DLBCL亞型．其中具有代表性的有Hans模型、Muris模型和Amen等人提出的分類模型^7-9。