[發明專利]一種從茶多糖中獲取均一果膠多糖的方法及獲得的均一果膠多糖

有效

• 申請號: 201210172141.2
• 申請日: 2012-05-30
• 公開（公告）號: CN102675483A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 王順春;王輝俊;鮑斌;施松善;王崢濤;胡之璧
• 申請（專利權）人: 上海中醫藥大學
• 主分類號: C08B37/06
• 分類號: C08B37/06
• 代理公司: 上海海頌知識產權代理事務所(普通合伙) 31258
• 代理人: 何葆芳

1.一種從茶多糖中獲取均一果膠多糖的方法，其特征在于，包括如下步驟：

a)將干燥茶葉或提取茶多酚后的干燥茶渣粉碎至40～100目；

b)用水于100℃提取二次，第一次加水體積是茶葉或茶渣質量的15倍，第二次加水體積是茶葉或茶渣質量的10倍；合并二次提取液，濃縮，加入乙醇進行醇沉，控制醇沉體系中的乙醇濃度為40vol%或70vol%；醇沉24小時后，過濾，收集沉淀；對沉淀進行離心和冷凍干燥，得茶葉多糖粗品或茶渣多糖粗品；

c)將步驟b)獲得的茶葉多糖粗品或茶渣多糖粗品上樣于DEAE-Sepharose柱，依次用水、0.1mol/L的氯化鈉水溶液、0.2mol/L的氯化鈉水溶液進行洗脫；使用硫酸-苯酚法跟蹤洗脫曲線，分別收集利用0.1mol/L的氯化鈉水溶液和0.2mol/L的氯化鈉水溶液進行洗脫的有效部位；

d)將步驟c)得到的有效部位分別用適量水或0.2mol/L的氯化鈉水溶液進行溶解，離心，取上清液上樣于丙烯葡聚糖凝膠色譜柱或葡聚糖凝膠色譜柱，用水或0.2mol/L的氯化鈉水溶液進行洗脫；利用示差折光檢測器檢測跟蹤洗脫曲線，根據洗脫曲線收集洗脫的有效部位；濃縮，冷凍干燥，即得均一果膠多糖：均為1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖。

2.由權利要求1所述方法獲得的均一果膠多糖，包括如下果膠多糖中的任意一種或二種以上：

平均分子量為2.7×10⁵道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為90.7%，甲酯化度為28.0%，乙酰酯化度為1.97‰的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPS4-1B；

平均分子量為3.1×10⁴道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為100%，甲酯化度為28.4%，乙酰酯化度為4.84‰的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPS4-2A；

平均分子量為1.0×10⁴道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為99.5%，甲酯化度為35.0%，乙酰酯化度為0的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPS7-1B；

平均分子量為6.5×10⁴道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為87.6%，甲酯化度為9.5%，乙酰酯化度為57.2‰的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPS7-2A；

平均分子量為8.6×10⁵道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為99.0%，甲酯化度為30.5%，乙酰酯化度為1.27‰的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPSR4-1B；

平均分子量為3.7×10⁵道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為98.5%，甲酯化度為28.3%，乙酰酯化度為9.15‰的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPSR4-2A；

平均分子量為6.5×10⁴道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為100%，甲酯化度為33.3%，乙酰酯化度為0的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPSR7-1B；

平均分子量為2.8×10⁵道爾頓，半乳糖糖醛酸含量為100%，甲酯化度為26.1%，乙酰酯化度為7.97‰的1,4連接的聚半乳糖醛酸類果膠多糖，記為TPSR7-2A。

3.一種權利要求2所述的TPS4-1B均一果膠多糖的制備，其特征在于，包括如下步驟：

11)將干燥茶葉粉碎至40～100目；

12)用水于100℃提取二次，第一次加水體積是茶葉質量的15倍，第二次加水體積是茶葉質量的10倍；合并二次提取液，濃縮，加入乙醇進行醇沉，控制醇沉體系中的乙醇濃度為40vol%；醇沉24小時后，過濾，收集沉淀；對沉淀進行離心和冷凍干燥，得茶葉多糖粗品；

13)將步驟12)獲得的茶葉多糖粗品上樣于DEAE-Sepharose柱，依次用水、0.1mol/L的氯化鈉水溶液進行洗脫；使用硫酸-苯酚法跟蹤洗脫曲線，收集利用0.1mol/L的氯化鈉水溶液進行洗脫的有效部位；

14)將步驟13)得到的有效部位用適量0.2mol/L的氯化鈉水溶液進行溶解，離心，取上清液上樣于丙烯葡聚糖凝膠色譜柱，用0.2mol/L的氯化鈉水溶液進行洗脫；利用示差折光檢測器檢測跟蹤洗脫曲線，根據洗脫曲線收集洗脫的有效部位；濃縮，冷凍干燥，即得所述的均一果膠多糖。