[發(fā)明專利]桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210159880.8
• 申請日: 2012-05-21
• 公開（公告）號: CN102675188A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李強(qiáng);季更生;谷緒頂;費(fèi)娟娟;吳再強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇科技大學(xué)
• 主分類號: C07D211/46
• 分類號: C07D211/46
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

1.一種桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）發(fā)酵：將桑葉加入纖維素酶產(chǎn)生菌種子液中，恒溫振蕩培養(yǎng)得到發(fā)酵液；

（2）提取及純化：采用酸提取法或醇提取法提取發(fā)酵液，將所得提取液純化，得到1-脫氧野尻霉素。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：步驟（1）中，所述纖維素酶產(chǎn)生菌種子液由纖維素酶產(chǎn)生菌于產(chǎn)酶培養(yǎng)基中恒溫振蕩培養(yǎng)制得。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：所述纖維素酶產(chǎn)生菌為里氏木霉(Trichoderma?reseei)、康寧木霉（Trichoderma?koningii）、綠色木霉（Trichoderma?viride）或黑曲霉Aspergillus?niger)。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：所述產(chǎn)酶培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖1～3g/L，微晶纖維素2～3g/L，蛋白胨1～2g/L，（NH₄）₂SO₄2～3g/L，KH₂PO₄3～4g/L，尿素0.4～0.6g/L，CaCl₂·2H₂O?0.6～1.0g/L,MgSO₄·7H₂O?0.4～0.8g/L，F(xiàn)eSO₄·7H₂O?0.7～1.1×10^-2g/L,MnSO₄·H₂O?2.6～4.8×10^-3g/L,ZnSO₄·H₂O?2.6～4.0×10^-3g/L,CoCl2·6H₂O?5.0～8.0×10^-3g/L，吐溫800.3～0.5g/L，其余為水，5.0～7.0。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：步驟（1）中，每100mL纖維素酶產(chǎn)生菌種子液中加入桑葉0.2-1.0g。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：步驟（1）中，所述纖維素酶產(chǎn)生菌種子液的pH為5.0～7.0。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：培養(yǎng)溫度為28～35℃，振蕩速度為150～180r/min，培養(yǎng)時間為6～24h。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：步驟（2）中，所述酸提取法包括以下步驟：離心發(fā)酵液，下層沉淀與酸水溶液恒溫浸提后離心，取上層提取液；下層沉淀重復(fù)上述操作；合并提取液。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：所述酸水溶液為鹽酸水溶液，所述鹽酸水溶液的濃度為0.03～0.07mol/L，每100mL鹽酸水溶液中加入1-3g沉淀，浸提溫度為60-80℃。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的桑葉中1-脫氧野尻霉素的提取方法，其特征在于：步驟（2）中，所述提取液純化包括以下步驟：提取液加入三氯乙酸水溶液后離心；所得上清液經(jīng)大孔吸附樹脂分離，洗脫劑為無水乙醇；濃縮洗脫液，即得1-脫氧野尻霉素。