[發明專利]單純皰疹病毒Ⅱ型基因重組減毒活疫苗及其制備方法無效
| 申請號： | 201210159325.5 | 申請日： | 2010-08-16 |
| 公開（公告）號： | CN102671193A | 公開（公告）日： | 2012-09-19 |
| 發明（設計）人： | 劉景偉 | 申請（專利權）人： | 鄭州金森生物科技工程有限公司 |
| 主分類號： | A61K39/245 | 分類號： | A61K39/245;C12N7/04;C12N15/38;A61P31/22;C12R1/93 |
| 代理公司： | 鄭州紅元帥專利代理事務所(普通合伙) 41117 | 代理人： | 黃軍委 |
| 地址： | 450001 河南省鄭州市*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 單純 皰疹病毒 基因 重組 減毒活 疫苗 及其 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種單純皰疹病毒II型基因重組減毒活疫苗，其特征在于敲除了其基因組中的UL43～UL47基因。
2.一種如權利要求1所述的單純皰疹病毒II型基因重組減毒活疫苗，其特征在于聯合敲除了其基因組中的UL43到UL47基因和其它復制或感染非必需基因片段；所述其它復制或感染非必需基因片段是US9到US12基因。
3.一種如權利要求1或2所述的單純皰疹病毒II型基因重組減毒活疫苗的制備方法，其特征在于：
步驟一：取皰疹患者的水泡液，分離鑒定出野生單純皰疹病毒II型；
步驟二：擴大培養后提取病毒完整基因組設計引物擴增出單純皰疹病毒II型病毒基因組的UL43基因左側700bp至2000bp的同源側翼序列和單純皰疹病毒II型病毒基因組的UL47基因右側700bp至2000bp的同源側翼序列；
步驟三：將步驟二所述同源側翼序列和熒光蛋白基因克隆至pShuttle-CMV載體，使熒光蛋白基因位于同源側翼序列之間，再和單純皰疹病毒II型基因組共轉染至Vero細胞中，進行同源重組；
步驟四：在熒光顯微鏡下使用一種或者聯合使用多種熒光蛋白基因作為標記挑選出重組病毒；經過空斑純化后可獲得單純皰疹病毒II型基因重組減毒活疫苗。
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