[發明專利]制備新伐他汀及中間體的方法

無效

• 申請號: 201210151032.2
• 申請日: 2004-10-20
• 公開（公告）號: CN102703539A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: B·摩根;M·伯克;M·萊溫;朱作霖;J·查普林;K·庫什特德約;黃子林;W·格林伯林
• 申請（專利權）人: 維萊尼姆公司
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06;C12P7/42
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民

1.用于制備新伐他汀的方法，其包括：

(i)包括以下步驟的方法：

(a)酶促水解洛伐他汀、洛伐他汀酸或洛伐他汀酸鹽，產生三醇酸或三醇酸鹽；

(b)內酯化和酰化三醇酸，產生4-乙酰基內酯，其中所述酰化包括：通過區域選擇性酰化4’-OH，保護內酯環上的4位羥基(4’-OH)；

(c)酶促酰化4-乙酰基內酯的8位羥基(8’-OH)，產生4-乙酰基新伐他汀；和

(d)化學地或是酶促地選擇性去除4’位的酰基保護基團，從而產生新伐他汀；

(ii)(i)所述的方法，其中所述步驟(b)中的酰化包括，通過酶促區域選擇性酰化4’-OH，保護內酯環上的4位羥基(4’-OH)；

(iii)(i)或(ii)所述的方法，其中所述步驟(c)中的酶促酰化4-乙酰基內酯8位羥基(8’-OH)，酶促地區域選擇性酰化第8位，產生4-乙酰基新伐他汀；

(iv)同型二酰基化方法，包括以下步驟：

(a)酶促水解洛伐他汀、洛伐他汀酸或洛伐他汀酸鹽，產生三醇酸；

(b)通過內酯化，從三醇酸產生二醇內酯；

(c)通過化學酰化，酰化二醇內酯的內酯環上的第4位(4’-OH)和第8位(8’-OH)，產生4,8-二乙酰基內酯；和

(d)通過酶促水解，選擇性去除4’位的酰基，從而產生新伐他汀；

(v)(i)至(iv)中任一項所述的方法，其中至少一個步驟是在單獨的反應容器中進行的；

(vi)(i)至(v)中任一項所述的方法，其中至少兩個步驟是在單獨的反應容器中進行的；

(vii)(i)至(vi)中任一項所述的方法，其中至少一個步驟是用細胞提取物進行的；

(viii)(i)至(vii)中任一項所述的方法，其中至少一個步驟是在全細胞中進行的；

(ix)(i)至(viii)中任一項所述的方法，進一步包括新伐他汀的結晶；

(x)(ix)所述的方法，進一步包括新伐他汀的重結晶；

(xi)(i)至(x)中任一項所述的方法，進一步包括重新內酯化，用以提供具有所需純度的新伐他汀；

(xii)(i)至(xi)中任一項所述的方法，其中至少一個酶促反應是用水解酶進行的，所述水解酶是由與SEQ?ID?NO:1、SEQ?ID?NO:3或SEQ?ID?NO:5有至少55%、56%、57%、58%、59%、60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的序列同一性，或序列完全相同(100％)的核酸所編碼的，或者是其酶促活性片段；

(xiii)(i)至(xii)中任一項所述的方法，其中至少一個酶促反應是通過水解酶進行的，所述水解酶具有的序列和SEQ?ID?NO:2、SEQ?ID?NO:4或SEQ?ID?NO:6有至少約50％、51％、52％、53％、54％、55%、56%、57%、58%、59%、60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更高的序列同一性，或序列完全相同(100％)，或者是其酶促活性片段；

(xiv)(i)至(xiii)中任一項所述的方法，其中所述方法包括酶促水解洛伐他汀，產生三醇酸或三醇酸鹽，隨后通過內酯化三醇酸和酶促酰化內酯環的第4位(4’-OH)，產生4-酰基內酯，之后酶促酰化4-酰基內酯，產生4-乙酰基新伐他汀，然后通過區域選擇性酶促水解4-乙酰基新伐他汀，產生新伐他汀。

2.制備4-乙酰基內酯的方法，包括酶促水解洛伐他汀，產生三醇酸或三醇酸鹽，隨后通過內酯化三醇酸，產生二醇內酯，然后通過區域選擇性酰化二醇內酯中內酯環上的第4位(4’-OH)，產生4-乙酰基內酯。