[發明專利]一種具有抗腫瘤活性的鉑（II）配合物及其制備方法

有效

• 申請號: 201210150825.2
• 申請日: 2012-05-16
• 公開（公告）號: CN102659849A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 王慶琨;普紹平;彭娟;黃天俊;王蒙;劉涼萌
• 申請（專利權）人: 昆明貴研藥業有限公司
• 主分類號: C07F15/00
• 分類號: C07F15/00;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，涉及一種鉑配合物，這種配合物具有抗腫瘤活性。

背景技術

癌癥是一種嚴重威脅人類健康和生命的疾病，是繼心腦血管疾病之后的全球第二大死亡疾病。近年來，由于環境惡化、不良生活習慣及人口老齡化等因素的影響，我國的癌癥發病率不斷增加。癌癥已成為人類亟待攻克的醫學難題之一。

在20世紀60年代，美國密執安州立大學教授Rosenberg在研究直流電場對大腸桿菌生長的影響時發現順鉑具有抗癌活性，并通過臨床驗證，順鉑對多種腫瘤均有良好的治療效果，從而開辟了金屬鉑絡合物抗癌作用研究的新領域。目前鉑類抗癌藥物已成為癌癥化療中不可缺少的藥物，已有順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、奈達鉑、舒鉑、洛鉑等獲批準上市。但目前上市的藥物也存在許多自身固有的缺點：毒副作用大，會導致惡心、嘔吐、骨髓抑制等，彼此之間存在交叉耐藥性及抗癌譜窄等，這些缺點限制了它們更廣泛的使用。尋找低毒、高效、廣譜及缺乏交叉耐藥性成為了鉑族藥物研究的重要方向。

研究發現，某些天然藥物中的有效成分的金屬配合物的生物活性明顯強于單一的有效成分，以斑蝥酸、槲皮素為離去基團與鉑配位的新型抗癌藥物相繼推出。

沒食子酸亦稱五倍子酸或棓酸，是一種有機酸，可見于五倍子、漆樹、茶等植物中，化學式C₆H₂(OH)₃COOH?。體外對金黃色葡萄球菌、八疊球菌、α－型鍵球菌、奈瑟氏球菌、綠膿桿菌、弗氏痢疾桿菌、傷寒桿菌Hd、副傷寒桿菌A等有抑制作用,其抑菌濃度為5mg/ml。體外,?在3%的濃度下對17種真菌有抑菌作用,?對流感病毒亦有一定抑制作用。?對嗎啉加亞硝鈉所致的小鼠肺腺瘤有強抑制作用。本發明根據沒食子酸的這個特點，將其與鉑配位。

發明內容

本發明的目的是提供一種具有抗腫瘤活性的鉑配合物。

本發明目的所說的鉑配合物，以沒食子酸根為離去基團，以環戊胺，甲胺為伴隨基團，結構如下：

。

本發明的鉑配合物中文化學名稱為順式-沒食子酸根-環戊胺、甲胺合鉑(II)，分子式為Pt(CNH₅)(C₅NH₁₁)(C₇H₄O₅)，分子量為479。

接種細胞：用含10％胎牛血清的培養液（DMEM或者RMPI1640）配成單個細胞懸液，以每孔5000-10000個細胞接種到96孔板，每孔體積100μL，貼壁細胞提前12小時接種培養。加入待測化合物溶液（固定濃度40μmol/L初篩，在該濃度對腫瘤細胞生長抑制在50%附近的化合物設5個濃度進入梯度復篩），每孔終體積200μL，每種處理均設3個復孔。顯色：37攝氏度培養48小時后，每孔加MTT溶液20μL。繼續孵育4小時，終止培養，吸棄孔內培養上清液，每孔加200μL的SDS溶液（10%），過夜孵育（溫度37℃），使結晶物充分融解。比色：選擇595nm波長，酶聯免疫檢測儀（Bio-Rad?680）讀取各孔光吸收值，記錄結果，以濃度為橫坐標，細胞存活率為縱坐標繪制細胞生長曲線，應用兩點法（Reed?and?Muench法）計算化合物的IC50（μm）值。

結果見下表：

從結果可以看出，化合物具有一定的體外腫瘤生長抑制活性，對白血病HL-60，乳腺癌MCF-7的IC₅₀<10μm。

具體實施方式

本發明鉑配合物制備：

所用試劑：純度不小于98%的順式-二碘-環戊胺，甲胺合鉑(II)，市售分析純硝酸銀，市售分析純一水合沒食子酸，市售分析純無水乙醇。

制備過程：

順式-二碘-環戊胺、甲胺合鉑(II)采用文獻（US4533502）報道的方法制備，將順式-二碘-二環戊胺合鉑(II)在高氯酸溶液中反應至黃色固體完全轉變為棕色固體為止，將棕色固體在甲胺溶液中反應至完全變為黃色固體為止。

稱取5.7g（0.01mmol）順式-二碘-環戊胺、甲胺合鉑(II)加入少量純化水攪成懸濁液，稱取3.4g（0.02mmol）硝酸銀用純化水溶解后加入到環鉑懸濁液中，補充純化水到約100ml在55~60℃反應約3.5h將AgI過濾后得到淺黃色水解溶液。稱取1.9g（0.01mmol）沒食子酸，用250ml無水乙醇溶液溶解，在避光攪拌的條件下加入到水解溶液中，55℃反應6h。將得到的固體過濾，先后用水、無水乙醇各洗2次后干燥得到2.7g淺黃色固體。元素分析：分子式PtC₁₃H₂₀N₂O₅，C、H、N、Pt的計算值分別C?32.57%，H4.17%,?N5.84%,?Pt?40.71%;?實際檢測值?C?32.52%，H4.05%,?N5.79%,?Pt?40.64%。主要紅外峰及歸屬：O-H?(3429.10cm^-1?st),?N-H(3213.00,1586.00cm^-1?st),?C-H?(2940.00cm^-1?,?2857.23cm^-1??st),?C=O?(1607.00cm^-1?st)?C=O?(1390.00cm^-1?δ??)?FAB⁺–MS（m/z）：480（[M+1]⁺,?100%)。¹H-NMR:?1.20~1.25?(m,?CH_3?of??aminomethane);?1.40~1.42?(d,?CH₂CHHCHHCH₂?of?cyclopentane);?1.51~1.52?(d,?CH₂CHHCHHCH₂?of?cyclopentane);?1.58~1.59?(m,CHHCHCHH?of?cyclopentane)?;?1.80~1.82?(d,?CHHCHCHH?of?cyclopentane);?2.63~2.64?(d,?CH₂CHCH_2?of?cyclopentane);?5.01~5.02?(m,?NH₂?of?aminomethane);?5.11~5.13?(d,?NH₂?of?cyclopentane);?5.29~5.31?(m,?OH?of?Gallic?acid);?7.10~7.12?(m,?CHCCH?of?Gallic?acid)。