[發明專利]結構可控型丙烯酸類共聚物的合成方法及其在促堿性蛋白體外復性中的應用

無效

• 申請號: 201210150048.1
• 申請日: 2012-05-16
• 公開（公告）號: CN102675505A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 黃志鋒;劉白玲;牛建樓;葉朝輝;謝瑤瑤;宋林濤
• 申請（專利權）人: 溫州醫學院;中國科學院成都有機化學有限公司
• 主分類號: C08F120/06
• 分類號: C08F120/06;C08F220/06;C08F220/04;C12N9/36;C07K14/475;C07K14/50;C07K1/14
• 代理公司: 溫州甌越專利代理有限公司 33211
• 代理人: 李友福

1.一種結構可控型丙烯酸類共聚物的合成方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

（1）配制25-40重量份的與目標丙烯酸共聚物組成比例相同的共聚單體混合液，取0.25-2.0重量份水溶性引發劑溶解到30-60重量份蒸餾水中配制成引發劑水溶液；

（2）取40-100重量份蒸餾水置于反應瓶后升溫至60-70℃，加入10重量份步驟（1）中的引發劑水溶液；

（3）反應10min后升溫至75-80℃，然后在2.5h內滴加完步驟（1）中的單體混合液和剩余的引發劑溶液，升溫至80℃-90℃，反應1-3h；

（4）反應完成后降至室溫，產物出料，經冷凍干燥得共聚物；

其中所用共聚單體為丙烯酸和α-烷基丙烯酸，或者是α-烷基丙烯酸中不同的兩類，其中烷基可以是??-（CH2）nCH3，n=0-4；所述引發劑為過硫酸鉀、過硫酸銨等過硫酸鹽中的任一種。

2.一種根據權利要求1所述的結構可控型丙烯酸類共聚物在促堿性蛋白體外復性中的應用，其特征在于包括以下步驟：

（1）取適量堿性蛋白溶于20-100mM?pH=8.5?含8M尿素、30mM?DTT?的?Tris-HCl緩沖液中，變性堿性蛋白終濃度為10mg/mL，室溫放置至完全變性；

（2）采用PD-10柱子脫除DTT，然后將變性堿性蛋白加入?20-100mM?Tris-HCl，pH=6.0-8.5,?2-4mM?EDTA，0.3-1mM?GSSG和3-10mM?GSH的復性緩沖液中，使得堿性蛋白終濃度為1mg/mL；在復性緩沖液中加入0.02%-0.32%丙烯酸類共聚物；

（3）室溫放置一定8-24h，測定堿性蛋白濃度、活性和復性堿性蛋白結構。