[發(fā)明專利]一種黃花倒水蓮的組織培養(yǎng)繁殖方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210147606.9
• 申請(qǐng)日: 2012-05-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102640708A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-08-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林文革;吳美華;張東海;陳細(xì)萍;曹冬萍;溫亞鋒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 地緣（廈門(mén)）生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 廈門(mén)市誠(chéng)得知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 35209
• 代理人: 方惠春

1.一種黃花倒水蓮的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）外植體采集及消毒：取黃花倒水蓮當(dāng)年生帶腋芽幼嫩莖段作為外植體，用洗潔精浸泡處理10?min，用軟毛刷輕輕刷洗莖段表面，流水沖洗30?min，置于超凈工作臺(tái)上，剪成帶1-2個(gè)節(jié)間的莖段，用質(zhì)量濃度為0.1%?的KMnO4浸泡處理5min，無(wú)菌水沖洗2遍，體積濃度為75%的乙醇浸泡處理20?s，再用質(zhì)量濃度為0.1%的升汞浸泡處理10?min，無(wú)菌水沖洗6遍，獲得無(wú)菌材料；

（2）不定芽的誘導(dǎo)：將上述無(wú)菌材料接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度25±1?℃，光照時(shí)間11?h/d，光照強(qiáng)度3000?LX的條件下誘導(dǎo)黃花倒水蓮不定芽，誘導(dǎo)培養(yǎng)30天；?

（3）不定芽增殖培養(yǎng)：將誘導(dǎo)出的黃花倒水蓮不定芽轉(zhuǎn)接至不定芽增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度25±1?℃，光照時(shí)間11?h/d，光照強(qiáng)度3000?LX，增殖培養(yǎng)25天；

（4）不定芽生根培養(yǎng)：將增殖培養(yǎng)的不定芽轉(zhuǎn)入不定芽生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度25±1?℃，光照時(shí)間11?h/d，光照強(qiáng)度3000?LX，生根培養(yǎng)25天即可獲得組培苗；

（5）煉苗及移栽：待組培苗80%長(zhǎng)出根原基時(shí)將其移至大棚進(jìn)行煉苗，7?天后將瓶苗輕輕夾出，洗凈根部培養(yǎng)基，用質(zhì)量濃度為0.1%的代森猛鋅浸泡處理2～3?min，陰干，待植株枝干上的水分陰干好后，移栽入事先已用質(zhì)量濃度為0.1%的高錳酸鉀消毒的移栽基質(zhì)中，保持環(huán)境溫度25±1?℃，噴霧保濕，使空氣濕度保持在85-95%，覆蓋遮陰率70%的遮陽(yáng)網(wǎng)，每7?天噴灑一次廣譜殺菌劑，30?天后長(zhǎng)出新根時(shí)澆一次兩倍MS大量元素溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃花倒水蓮的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于：所述步驟（2）中的不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：1/2MS+BA1.0-3.0?mg/L+NAA0.1-0.3?mg/L，其中，不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加白砂糖30?g/L，卡拉膠6.5?g/L，調(diào)節(jié)不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH使pH=5.8-6.0。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃花倒水蓮的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于：所述步驟（3）中的不定芽增殖培養(yǎng)基為：WPM+BA1.0-3.0mg/L+NAA?0.1-0.3?mg/L?L，不定芽增殖培養(yǎng)基中添加白砂糖30?g/L，卡拉膠6.5?g/L，調(diào)節(jié)不定芽增殖培養(yǎng)基的pH使pH=5.8-6.0。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃花倒水蓮的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于：所述步驟（4）中的不定芽生根培養(yǎng)基為：1/2WPM+IBA?0.1-0.3?mg/L+ABT?0.2-0.4?mg/L，不定芽生根培養(yǎng)基中添加白砂糖15?g/L，卡拉膠6.5?g/L，調(diào)節(jié)pH值5.8-6.0。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃花倒水蓮的組織培養(yǎng)繁殖方法，其特征在于：所述步驟（5）中的移栽基質(zhì)及其重量比為：泥炭土：黃泥土：珍珠巖=2：1：1。