[發明專利]γ-分泌酶抑制劑的新用途以及一種提高真核細胞對CVB病毒易感性的方法

無效

• 申請號: 201210144092.1
• 申請日: 2012-05-10
• 公開（公告）號: CN103387952A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 凌焱;陳惠鵬;孫芳;李玉霞;劉剛;張小男;湯潔;毛艷;賈天野
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院生物工程研究所
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;C12N7/00;A61K48/00
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 魯兵

1.γ-分泌酶抑制劑（GSI）在制備加快CVB病毒感染細胞進程和增加病毒感染量的藥物中的應用。

2.根據權利要求1所述應用，其特征在于：所述γ-分泌酶抑制劑（GSI）為購自Merk公司的InSolution^TMγ-Secretase?Inhibitor?X，是一種白色粉末，溶于DMSO制成GSI溶液。

3.根據權利要求2所述應用，其特在于：所述GSI溶液工作濃度為100nM。

4.一種提高真核細胞對CVB病毒易感性的方法，是用γ-分泌酶抑制劑（GSI）處理所述真核細胞，再用CVB病毒感染該處理后細胞，使得CVB病毒感染真核細胞的進程和感染效果增強。

5.一種獲得高感染量CVB病毒的方法，是用γ-分泌酶抑制劑（GSI）處理真核細胞，再用CVB病毒感染該處理后細胞，CVB病毒的感染量及滴度升高。

6.根據權利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述用γ-分泌酶抑制劑（GSI）處理細胞的方法為：將細胞鋪板，待細胞貼壁后，向細胞培養基中加入GSI溶液，使GSI在培養基中終濃度為100nM，5％CO₂恒溫孵箱培養48h(48-72h均可)，期間每隔12h（12-24h均可）補加一次(與第一次加入的等量)GSI溶液。

7.根據權利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：所述CVB病毒感染細胞的方法為：細胞經GSI處理后，吸出細胞培養基，加入CVB病毒液，4℃孵育1h，然后將病毒液吸出，用PBS漂洗細胞以洗去未吸附在細胞上的病毒，加入含2％FBS的DMEM培養基作為病毒感染培養基，37℃孵箱培養1h-12h之間任何時間。

8.權利要求4或5或6或7所述的方法，其特征在于：所述真核細胞為是離體的，且為CVB易感細胞，優選上皮細胞，實驗選擇HeLa細胞。

9.根據權利要求4-8任一所述的方法，其特征在于：所述γ-分泌酶抑制劑（GSI）為購自Merk公司的InSolution^TMγ-Secretase?Inhibitor?X，是一種白色粉末。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：使用時γ-分泌酶抑制劑（GSI）溶于DMSO制成溶液，溶液工作濃度為100nM。