[發明專利]苦參堿在制備預防和治療阿爾茨海默氏病藥物中的應用

無效

• 申請號: 201210140492.5
• 申請日: 2012-05-08
• 公開（公告）號: CN102657645A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 張應玖;崔理立;滕藤
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: A61K31/4375
• 分類號: A61K31/4375;A61P25/28
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 張景林;劉喜生

技術領域

本發明屬于藥物研究領域，具體涉及苦參堿在制備預防和治療阿爾茨海默氏病的藥物中的新用途。

背景技術

阿爾茨海默氏病（AD）是一種以記憶和認知功能障礙為主要癥狀的多發于老年群體的神經退行性疾病，發病后較難治愈，目前主要的療法只限于短期緩解發病癥狀。AD主要的病理學特征包括腦神經元外出現的β淀粉樣蛋白（Aβ42）（其氨基酸序列參見中國專利201110094262.5中序列SEQ?ID?NO:1）的沉積和其進一步形成的老年斑（SP），細胞內過度磷酸化的Tau蛋白導致的神經纖維纏結和神經元的營養壞死等。很多證據表明Aβ42的寡聚化及形成的沉積很可能是AD發病的關鍵因素。Aβ42是由淀粉樣前體蛋白（APP）經過β-分泌酶和γ-分泌酶先后切割而成，淀粉樣蛋白級聯假說認為Aβ42的產生和清除之間的平衡由于某種原因被破壞，Aβ42在腦內聚集而導致了一系列的細胞和分子的變化繼而引起了神經機能的障礙和神經元的死亡，近來越來越多的研究工作支持Aβ42的寡聚體對神經具有更強的毒性，因此如何安全而有效地阻止甚至清除Aβ42寡聚體的毒性被認為是預防和治療AD的一種有效的方法。

中藥是中華文明歷經千年流傳下來的寶貴的文化遺產，中藥中的天然化合物不僅來源具有生物多樣性，而且代謝產物結構復雜多變，蘊含著無窮無盡的結構多樣性。近年來我國研究者從多方面展開中藥治療老年癡呆的研究，但由于中藥成分的復雜性，研究工作以臨床報道居多，理論與實驗研究少，許多臨床觀察診斷和療效的評價不夠嚴謹，客觀，缺少針對性的理化和影像學檢查等問題，使結果缺乏科學性和說服力。

天然藥物中的一些活性成分諸如皂苷類、黃酮類、酚酸類、萜類、生物堿類、蒽酮類等，雖然針對AD的作用靶點不盡相同，在體外或臨床研究顯示具有不同程度的針對AD的治療效果，但是由于有效成分多靶點、作用機理的不明確性、毒副作用難以評價、藥效不穩定等特點，中藥在治療AD方面難以得到認可，從天然藥物中通過高通連篩選出單體化合物，研究其藥理作用，分析其作用機制，就可以為中藥治療AD賦予科學的內涵，為進一步臨床應用和新藥開發提供借鑒。

苦參堿（Matrine），即α-苦參堿，是一種來自苦參植物的生物堿，屬于四環的喹嗪啶類，分子式為C₁₅H₂₄N₂O（化學結構式如下所示），分子量為248.37，無嗅，味苦，熔點為76℃，在乙醇、氯仿、甲苯和苯中極易溶解。眾多基礎及臨床研究發現：苦參堿具有抗炎、免疫抑制、抗心率失常、抗病毒、抗寄生蟲和鎮靜、鎮痛等功效。

發明內容

本發明的目的是提供苦參堿在制備預防和治療阿爾茨海默氏病的藥物中的新用途。

本發明利用Aβ42毒性誘導的細胞模型，發現苦參堿具有顯著抑制或中和Aβ42單體或Aβ42寡聚體的細胞毒性的作用，進一步檢測發現，苦參堿可以通過抑制Aβ42單體或Aβ42寡聚體的聚集來抑制Aβ42的神經毒性，從而確定了苦參堿在制備預防和治療阿爾茨海默氏病藥物中的新用途。

附圖說明

圖1：透射電子顯微鏡下Aβ42寡聚體（20μM，37℃，孵育12h）的形態圖，比例標尺為100nm；

圖2：苦參堿抑制或中和Aβ42單體和Aβ42聚集體細胞毒性的效應分析，其中1：苦參堿抑制組，2：苦參堿中和組，3：Aβ42單體損傷組，4：Aβ42寡聚體損傷組；

圖3：苦參堿對Aβ42單體和Aβ42寡聚體的二級結構的影響，其中1：Aβ42寡聚體組，2：（Aβ42寡聚體+苦參堿）組，3：Aβ42單體組，4：（Aβ42單體+苦參堿）組；

圖4：透射電子顯微鏡觀察苦參堿對Aβ42單體和Aβ42寡聚體的聚集形態影響，其中1：Aβ42寡聚體組（37℃孵育12h），2：（Aβ42寡聚體+苦參堿）組（37℃孵育12h），3：Aβ42單體組（37℃孵育24h），4：（Aβ42單體+苦參堿）組（37℃孵育24h），比例標尺為100nm；

圖5：硫磺素T（Th-T）法檢測苦參堿對Aβ42單體和Aβ42寡聚體聚集狀態的影響，其中1：Aβ42寡聚體組，2：（Aβ42寡聚體+苦參堿）組，3：Aβ42單體組，4：（Aβ42單體+苦參堿）組。

具體實施方式

實施例1：苦參堿抑制或中和Aβ42單體和Aβ42聚集體細胞毒性的效應分析

（1）Aβ42單體和Aβ42寡聚體的制備