[發明專利]一種蛹蟲草中多糖的提取純化方法無效

申請號：	201210134196.4	申請日：	2012-05-03
公開（公告）號：	CN102633900A	公開（公告）日：	2012-08-15
發明（設計）人：	周余慶;彭國平;蔣寧;劉紅錦	申請（專利權）人：	海安縣泓壽生物技術有限責任公司;江蘇省農業科學院
主分類號：	C08B37/00	分類號：	C08B37/00;A23L1/09
代理公司：	揚州市錦江專利事務所 32106	代理人：	江平
地址：	226623 江蘇省***	國省代碼：	江蘇;32
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種蟲草多糖提取純化方法
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【說明書】：

技術領域

本發明提供了一種蛹蟲草中多糖的提取純化方法，屬于農產品深加工技術領域。

背景技術

蛹蟲草(Cordyceps?militaris)又名北冬蟲夏草，與我國名貴中藥材冬蟲夏草(Cordyeeps?sinensis)為同屬異種，蟲草多糖（CMPS）是蛹蟲草中的重要的活性物質，蟲草多糖的單糖組分為半乳糖：甘露糖=6：5，它以β（1→2）連接的甘露糖為主干，支鏈由較大量的β（1→6）半乳糖和較大量的β（1→2）呋喃半乳糖構成，分別連接在主干的0-4和0-6上，是含少量蛋白有高度分支結構的雜多糖。蟲草多糖已被證實具有抗腫瘤、降血糖、抗肝纖維化作用及對單核巨嗜細胞系統的增強作用，還能提高免疫功能及治療肝的病毒性感染等，具有廣闊的開發前景。

超濾膜是根據不同的分子量大小來截留分離不同物質的技術的是近年來國內外新發展的分離技術，其基本原理是在常溫下以一定壓力和流量，利用不對稱微孔結構和半透膜介質，依靠膜兩側的壓力差作為推動力，以錯流方式進行過濾，使溶劑及小分子物質通過，大分子物質和微粒子如蛋白質、水溶性高聚物、細菌等被濾膜阻留，從而達到分離、分級、純化、濃縮目的的一種新型膜分離技術，并在醫藥領域(特別是天然藥物精制)中廣為應用，適合工業化生產。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從蛹蟲草中提取蟲草多糖的方法。

本發明包括以下步驟：

1）蛹蟲草中多糖的提取：將粉碎后的蛹蟲草原料和水以1:5～8的重量比連續回流提取2h后抽濾；將抽濾后的濾渣和水以1:3～5的重量比連續回流提取2h后抽濾，合并抽濾液；

2）蛹蟲草中粗多糖的制備：將合并后的抽濾液用蒸餾水分散至蛹蟲草生藥量為0.3～0.5g/ml的蟲草水分散溶液；將蟲草水分散液以氫氧化鈉調pH值至9～10后循環上樣于裝柱后的大孔樹脂，收集流出液；

3）蟲草多糖精制純化：將收集的流出液pH值調至中性，以10KDa的超濾膜透過，收集透過液，再以200KDa的超濾膜過濾所述透過液，取得蟲草多糖溶液，再將濃縮蟲草多糖溶液，取得蟲草多糖。

本發明采用大孔樹脂和超濾膜聯用分離蛹蟲草多糖的技術，具有高效、溫和、工藝簡單的特點，適合規模化推廣應用。本發明可以將蛹蟲草原料中的多糖低溫提取，最大限度地保持了多糖的生物活性；利用大孔樹脂分離及超濾膜純化后可去除提取物中的多糖和蛋白成分，使提取物中的多糖含量達到68%，精多糖得率為6.7%。產品蛹蟲草中多糖縮物雜質少，活性高,采用該技術具有工藝簡單，效率高，條件溫和，且無污染等優點，能有效降低分離成本。產品蛹蟲草中多糖活性高，既可以作為生產蟲草多糖單體的原料，也可以直接作為保健品和功能食品的添加劑。

本發明的主要優點和積極效果具體說明如下：

1、本發明采用水熱回流提法提取多糖，最大限度地保持了多糖的生物活性，粗多糖提取率達到?88%。

2、利用大孔樹脂和超濾膜聯用分離純化多糖，可根據活性多糖的分子量大小，進行針對性分離，利用大孔樹脂有效去除提取物中的大部分多糖和蛋白成分，利用超濾膜能針對多糖分子量大小，針對性收集活性多糖，獲得產品的生物活性、純度較高。

3、另外，本發明采用超濾方法具有超濾過程是在常溫下進行，條件溫和無成分破壞；濾過程不發生相變化，無需加熱，能耗低，無需添加化學試劑，無污染，是一種節能環保的分離技術；超濾技術分離效率高，對稀溶液中的微量成分的回收、低濃度溶液的濃縮均非常有效；分離裝置簡單、流程短、操作簡便、易于控制和維護。

另外，本發明所述步驟2）中蟲草水分散溶液與大孔樹脂的重量比為1:1.5～2，以保證蟲草水分散液中多糖被完全吸附。

所述步驟2）中流出液的流出速度為30～50ml/min，此速度流出可保證多糖不被流出液流出力的影響而解吸附。

附圖說明

圖1為多糖測定標準曲線圖。

具體實施方式

?一、提取工藝：

1、蟲草多糖的提取：

蛹蟲草子實體3kg，粉碎（粗粉為宜），投入多功能提取罐中，加入15～24?kg的水連續回流提取2h，抽濾。