[發(fā)明專利]一種基于紙基薄層層析板的樣品前處理方法及其應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210134005.4
• 申請日: 2012-04-28
• 公開（公告）號: CN102636596A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發(fā)明（設計）人: 張宜明;葉海朋;王彥波;壽林飛;寧靜恒;王姝婷
• 申請（專利權）人: 杭州市疾病預防控制中心
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發(fā)明涉及薄層色譜分離領域，具體涉及一種基于紙基薄層層析板的樣品前處理方法及其應用。

背景技術

色譜技術是對復雜混合物分離分析最有效的方法。薄層色譜(Thin?Layer?Chromatography)又稱為薄層層析，是屬于固-液吸附色譜。其點樣斑點小、清晰不擴散、分離時間短、靈敏度高、分離效果好，是近年來發(fā)展起來的一種高效、快速而又簡單的色譜法。因此，薄層色譜被廣泛應用于醫(yī)藥、化工、環(huán)保、食品等領域，尤其是對天然化學產物中有效成分的分離和分析發(fā)揮著很大的作用。

與紙層析相比，薄層層析具有較好的分離效能，混合物展開分離迅速，一般展開一次約在15-60分鐘，分離效能比紙層析好。此外，樣品溶液上樣量少，一般幾微升至幾十微升就可以在薄層層析板上很好的分離，且操作簡便，不需要特殊昂貴而又復雜的儀器，便于普及。因為薄層層析色譜的固定相物質多為惰性無機化合物，所以可以使用一些腐蝕性顯色試劑，這是紙層析法所不能比擬的。另外，薄層色譜的分離容量較紙色譜大，因此可以用作微量物質分離的制備色譜。

作為一種純化手段，薄層層析色譜與氣相色譜、液相色譜、紅外光譜等方法聯(lián)用常見于報道，利用薄層層析色譜做為樣品的前處理方法，操作簡單，應用廣泛。

近年來，食品中農藥殘留、獸藥殘留和非法食品添加劑等成為食品安全領域的熱點話題。在檢測手段上，針對這些問題發(fā)展了一系列檢測方法，而這些方法中樣品的前處理成為一個影響分析質量的重要環(huán)節(jié)。為提高儀器靈敏度，減少干擾，固相萃取以及凝膠色譜凈化等技術在這些樣品前處理中被廣泛應用并取得極大的發(fā)展。然而，盡管當前固相萃取技術已經成為一項相當成熟的樣品前處理技術，但本身也一些不足。如需要一定量的溶劑分別完成凈化、洗脫的過程，耗材成本較高、溶劑消耗量大、操作過程較為繁瑣等。因此，將薄層色譜引入這些樣品前處理過程中，可以通過較為簡單的薄層層析過程對樣品提取液進行凈化，以減少溶劑的消耗，極大的降低了檢測成本。薄層層析色譜兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點，既能適用于少量樣品(幾到幾百微克，最少甚至0.01微克)的分離，調整吸附層固相物質的量，也可分離較大量的樣品，最多可達500毫克。

現(xiàn)有技術中的樣品前處理方法中所使用的薄層層析板，不能方便地隨意裁減和卷曲折疊，得到樣品恒定比移值的條帶進行處理時，富集的目標化合物難以被完全洗脫附，不可避免受到其余位置富集物的影響，進而影響了制備效率，難以實現(xiàn)方便快捷的樣品前處理。

發(fā)明內容

本發(fā)明提供了一種基于紙基薄層層析板的樣品前處理方法及其應用，所要富集的待測組分能夠有效集中在條帶恒定比移值位置，且富集區(qū)域的色譜條帶可以按需要剪切下來，用有機溶劑提取待測組分，然后用氣相色譜等儀器進行定量分析，重現(xiàn)性好，并可同時分析多個樣品，快速高效地完成對復雜樣品的凈化和待測物的富集。

一種基于紙基薄層層析板的樣品前處理方法，包括如下步驟：在紙基薄層層析板底部位置負載待測樣品濃縮液，將紙基薄層層析板放入展開槽，加入展開劑進行薄層層析分離，剪切下恒定比移值位置的目標檢測物條帶，提取待測物，完成所述的樣品前處理。

所述的待測物即為采用本發(fā)明的前處理方法對被檢樣品進行處理得到的。在固定的層析條件下，待測物在紙基薄層層析板上的比移值是恒定的，這一點可以通過預先的實驗獲得，在之后的前處理過程中，直接在預定位置剪切下對應部分的紙基薄層層析板(剪切下恒定比移值位置的目標檢測物條帶)即可。

所述的紙基薄層層析板包括紙基板和涂布在紙基板上的涂布層；所述的紙基板為至少一面覆蓋有聚乙烯膜的紙；所述的涂布層涂布在紙基板的聚乙烯膜上。

所述的紙基板的厚度為0.10～0.30mm，所述的涂布層的厚度為0.20～1.00mm。

所述的涂布層采用涂布液制成，該涂布液各組分的質量百分比組成為粘合劑0.75％～7％，吸附劑12％～33.25％，水65％～85％。

所述的粘合劑為聚乙烯醇、羧甲基纖維素鈉、淀粉中的一種或多種，可以使吸附劑牢固地涂布在紙基板上，提高層析板的機械強度。

所述的吸附劑為硅膠、硅藻土、氧化鋁、硅酸鎂、硅酸鈣、碳酸鋅或玻璃粉，吸附劑的粒徑為150目～200目，可以提高分離效果。