[發(fā)明專利]一種發(fā)酵生產沙利霉素工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210129748.2
• 申請日: 2012-04-28
• 公開（公告）號: CN102643880A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發(fā)明（設計）人: 儲消和;陳中兵;蔡群芳;黃海濤;沈建;高圣君;黃會鴿
• 申請（專利權）人: 浙江升華拜克生物股份有限公司;內蒙古拜克生物有限公司
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18;C12R1/47
• 代理公司: 湖州金衛(wèi)知識產權代理事務所(普通合伙) 33232
• 代理人: 裴金華

技術領域

本發(fā)明涉及沙利霉素的發(fā)酵工藝優(yōu)化方法，特別是涉及一種菌體生長期補糖菌體產素期補油發(fā)酵生產沙利霉素工藝。

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背景技術

沙利霉素是一種聚醚類一元羧酸抗生素，具有特殊的環(huán)狀結構，是典型的離子載體抗生素。沙利霉素是由白色鏈霉菌(Streptomysis?albus)產生的聚醚類離子載體型動物專用抗生素,?由于其廣譜高效的抗球蟲病性能而得到廣大飼養(yǎng)者的認可。

目前沙利霉素的生產主要通過生物發(fā)酵的方法進行，主要以豆油作為其主要的發(fā)酵碳源，例如中國專利CN1230596A公開的，但是隨著近年來油的價格持續(xù)上升，沙利霉素的發(fā)酵成本相應有了很大的提高；并且由于油的自身特性，發(fā)酵基質中過多油的積累會造成發(fā)酵體系溶氧的降低，同時其還會附著于菌絲體表面，不利于菌體代謝，甚至還會出現(xiàn)發(fā)酵液結塊的現(xiàn)象，對后期處理造成困難。

2005年8月《山東大學學報（理學版）》第40卷第4期“鹽霉素發(fā)酵補油工藝研究”中公開了一種菌體產素期補油的工藝，該文獻雖然優(yōu)化了補油工藝，即減少初始發(fā)酵培養(yǎng)基中的豆油含量，并在發(fā)酵過程中以豆油、脂肪酸含量分數(shù)和豆油消耗速率為指標進行補油，但是若不能使菌體代謝活力維持在一個較高的水平，依然會造成菌體對油的利用率不高，從而導致發(fā)酵水平的低下。因此，如何在菌體生長期增強菌體的代謝活力是提高發(fā)酵產量的關鍵因素。

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發(fā)明內容

針對現(xiàn)有技術中存在的問題，本發(fā)明提供一種發(fā)酵生產沙利霉素工藝，菌體生長期補糖菌體產素期補油，可使沙利霉素效價提高的同時降低生產成本。

一種發(fā)酵生產沙利霉素工藝，其特征在于包括以下工藝步驟：

發(fā)酵培養(yǎng)：將經斜面培養(yǎng)和種子培養(yǎng)所得種子液接種至裝有培養(yǎng)基的發(fā)酵罐，接種量8-12%，培養(yǎng)溫度30-35℃,壓力0.04-0.06MPa，DO控制在30%-100%,轉速250-500rpm；發(fā)酵進行30-50小時開始補加糖，控制發(fā)酵液中還原糖含量為3-10g/l；發(fā)酵進行到80-120小時，開始補加植物油，控制發(fā)酵液中脂肪酸含量為1-5wt%；發(fā)酵進行290-310h放罐。

本發(fā)明所述的菌體產素期是在發(fā)酵的次級代謝中產生沙利霉素的時間段。

當發(fā)酵進行到30-50小時，培養(yǎng)基中的還原糖含量降低，不利于菌體的生長，本發(fā)明采用在此時間段內補加糖來促進菌體的進一步生長，根據(jù)糖濃度控制補糖速率，糖濃度控制在3-10g/l。80-120小時，菌體進入次級代謝，需補加植物油來提高發(fā)酵效價，本發(fā)明在此時間段內開始采用連續(xù)流加方式補油，根據(jù)脂肪酸含量控制補油速率，脂肪酸濃度控制在1-5wt%。

作為優(yōu)選，所述的斜面培養(yǎng)是：將菌株接種到斜面培養(yǎng)基上，26-30℃下培養(yǎng)6-8天。

作為優(yōu)選，所述斜面培養(yǎng)基的組成是：可溶性淀粉1-3?wt%，硫酸鎂?0.02-0.08?wt%，氯化鈉?0.02-0.08?wt%，牛肉膏?0.05-0.2?wt%，硝酸鉀0.05-0.2?wt%，磷酸氫二鉀?0.02-0.08?wt%，亞硫酸鐵?0.0005-0.0015?wt%，瓊脂?1-3wt%，余量的蒸餾水；所述斜面培養(yǎng)基的pH?值為6.5-7.5。

作為優(yōu)選，所述的種子培養(yǎng)是：將經斜面培養(yǎng)所得孢子接入種子培養(yǎng)基，在30-35℃、220-260?r/min的條件下培養(yǎng)25-30h。

作為優(yōu)選，種子培養(yǎng)基的組成是：葡萄糖?2-8?wt%，黃豆粉2-4?wt%，酵母粉?0.5-2wt%，輕質碳酸鈣?0.1-0.4?wt%，余量的蒸餾水。

作為優(yōu)選，發(fā)酵罐中培養(yǎng)基的組成是：蔗糖2-6?wt%，棕櫚油?2-8wt%，氯化鉀?0.1-0.4wt%，氯化鈉?0.05-0.2?wt%，豆粕粉?0.1-0.8?wt%，胚芽粉?0.2-1wt%，磷酸氫二鉀?0.01-0.02wt%，硫酸鎂?0.005-0.02?wt%，乳化劑?0.02-0.08wt%，硫酸銨?0.1-1wt%，輕質碳酸鈣?0.1-0.5?wt%，余量的蒸餾水；所述發(fā)酵液的pH值為6.5-7.0。

作為優(yōu)選，所述糖為蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉的一種或多種。

作為優(yōu)選，所述植物油為棕櫚油、豆油、菜籽油的一種或多種。

作為優(yōu)選，所述補糖方式為連續(xù)流加，根據(jù)還原糖濃度控制補糖速率，還原糖濃度控制在3-10g/l。

作為優(yōu)選，所述補油方式為連續(xù)流加，根據(jù)脂肪酸含量控制補油速率，脂肪酸濃度控制在2-4wt%。

作為優(yōu)選，本發(fā)明在發(fā)酵進行到38-42小時，開始補加糖。