[發明專利]一種尿蛋白液體定量檢測試劑及方法

無效

• 申請號: 201210128004.9
• 申請日: 2012-04-27
• 公開（公告）號: CN102680701A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 虞留明;蔡江麗;田軍;孟雷
• 申請（專利權）人: 嘉興九七九生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N21/31
• 代理公司: 杭州天欣專利事務所 33209
• 代理人: 董力平

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種尿蛋白（Urinary?Protein）液體定量檢測試劑和方法。?

背景技術

尿液是由某些血液成分經過腎小球濾過作用，腎小管重吸收、集合、排泌形成的。臨床尿液檢測可以幫助醫生了解病患的泌尿生理功能和病理功能的變化，也可以間接反映全身多臟器及系統的功能情況。?

蛋白尿指的是尿液中含有非正常高濃度蛋白質的病癥，尿蛋白主要為白蛋白，同時也包含一些球蛋白和腎元分泌的蛋白質。在正常情況下，大多數蛋白質是不可以通過腎小球的濾過作用而進入尿液的，但是在腎臟功能受到損壞的情況下，一些蛋白質會進入尿液，形成蛋白尿。對尿中蛋白質含量進行檢測的意義在于可以診斷和治療腎臟及相關系統疾病，幫助醫生清晰地了解病人病情的嚴重程度。?

國內外臨床尿檢驗非常普遍，許多與腎功能，心血管，代謝病，感染病等有關領域的檢驗都需要進行尿液檢測。常規的尿檢驗包括以下10項：葡萄糖（GLU)、膽紅素(BIL)、尿膽原(URO)、酮體(KET)、白細胞(LEC)、亞硝酸鹽（NIT)、蛋白質(PRO)、酸堿度（pH）、潛血（BLD）和比重（SG），若是12項檢驗還包括維生素C（VC）和微量白蛋白（Microalbumin）。?

國內目前應用的尿檢驗技術主要是干化學試紙定性檢驗系統，只能提供定性分析結果如陰性或陽性，不能定量。此外，干化學試紙法受影響因素也較多，臨床工作中不可避免地會出現假陰性和假陽性，很難為臨床醫生提供準確的診斷信息。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是彌補現有的干化學試劑系統存在的缺陷，提供一種尿蛋白液體定量檢測試劑及方法。?

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案是該尿蛋白液體定量檢測試劑的制備方法包含以下制備步驟：?

a、往0.1－0.7L有機溶劑中加入0.1－1.0g焦酚，攪拌至完全溶解，形成焦酚溶液；

b、用蒸餾水溶解下列化合物：?0.1－0.5g琥珀酸、?0.01－0.1g苯甲酸鈉、0.01－1.0g?鉬酸鈉，完全溶解，得到中間溶液；

c、將中間溶液與焦酚溶液混合，攪拌混勻后定容至1L，形成尿蛋白液體定量檢測試劑。

本發明所述的有機溶劑為甲醇或乙醇或二甲基甲酰胺。?

本發明所述的有機溶劑優選為甲醇。?

本發明所述尿蛋白液體定量檢測試劑的制備步驟的優選配比為：?

a、往0.5L有機溶劑中加入0.4g焦酚，攪拌至完全溶解，形成焦酚溶液；

b、用0.4L蒸餾水溶解下列化合物：0.5g琥珀酸、0.09g苯甲酸鈉、0.06g?鉬酸鈉，完全溶解，得到中間溶液；

c、將中間溶液與焦酚溶液混合，攪拌混勻后定容至1L，形成尿蛋白液體定量檢測試劑。

本發明所述的任意一種試劑的尿蛋白液體定量檢測方法，包含以下步驟：?

a、把所述尿蛋白液體定量檢測試劑分裝后放入自動化分析儀的R1試劑倉，然后進行尿蛋白檢測項目的參數設置；樣品體積：2－10ml，R1試劑：50－150ml，校準類型：4AB，波長：600nm，檢測方法：終點法，測光點：0－20；

b、設定4個標準品濃度：0mg/dL、30mg/dL、100mg/dL、250mg/dL，測定不同濃度標準品的吸光值，制作濃度對吸光值的標準曲線；

c、根據標準曲線進行試劑檢測靈敏度分析；

d、根據標準曲線進行樣品的精密度和回收率試驗；?

e、根據標準曲線進行常用內源性物質的干擾分析試驗。

本發明所述的尿蛋白液體定量檢測方法，靈敏度為1mg/dL。?

本發明所述的尿蛋白液體定量檢測方法，檢測尿液樣本里的尿蛋白與內源性物質抗壞血酸、肌酐和葡萄糖無交叉反應。?

本發明所述的自動化分析儀為Hitachi7180、Olympus5400或邁瑞BS-800。?

本發明所述的自動化分析儀優選為Olympus5400。?

本發明同現有技術相比具有以下優點及效果：該液體定量檢測試劑及方法是利用生化反應原理，采用液體試劑系統，借助自動化分析儀對尿液中的蛋白質進行定量檢測的方法，同時具有定量、準確、快速和操作簡便的優點。?

附圖說明

圖1為Olympus5400自動化分析儀測定尿蛋白的標準曲線。?

具體實施方式

下面結合實施例對本發明做進一步的詳細說明，以下實施例是對本發明的解釋而本發明并不局限于以下實施例。?