[發(fā)明專利]一種復(fù)雜基質(zhì)水體樣品中雌激素及壬基酚、辛基酚、雙酚A的共檢測方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210127551.5
• 申請(qǐng)日: 2012-04-27
• 公開（公告）號(hào): CN102636611A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史江紅;吳唯;張暉;陳慶彩;劉曉薇;薄婷;賈彥舶
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種水環(huán)境中有機(jī)污染物的檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及復(fù)雜基質(zhì)水體樣品中雌激素及壬基酚、辛基酚、雙酚A的提取、凈化和儀器檢測方法。

背景技術(shù)

近年來，天然與合成雌激素雌酮(Estrone，E1)、17β-雌二醇(17β-Estradiol，E2)、17α-乙炔基雌二醇(17α-Ethinyl?Estradiol，EE2)，以及類雌激素活性物質(zhì)壬基酚(Nonylphenol，NP)、辛基酚(Octylphenol，OP)雙酚A(BisphenolA，BPA)作為典型的環(huán)境中內(nèi)分泌干擾物引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注。相關(guān)調(diào)查研究表明，水環(huán)境中ng/L濃度水平的雌激素足以導(dǎo)致水生生物的雌性化。而由人和哺乳動(dòng)物的尿液和糞便排放的雌激素以及制造奶瓶等食具、電子器件的包覆材料、紙水杯、金屬飲料罐的保護(hù)涂層、食品包裝材料等產(chǎn)生的類雌激素物質(zhì)壬基酚、辛基酚和雙酚A等的排放是不可避免的。

生活污水的集中處理和排放以及規(guī)?；笄蒺B(yǎng)殖，是造成河流或土壤環(huán)境中雌激素污染的最重要原因。歐美等國對(duì)多家污水處理廠雌激素濃度及去除效率的調(diào)查結(jié)果顯示，在污水處理廠出水及受納水體中殘留著ng/L濃度水平的雌激素。因此，調(diào)查和研究污水和畜禽養(yǎng)殖廢水中的雌激素及類雌激素物質(zhì)濃度對(duì)于該類物質(zhì)的控制和去除具有重要意義。但這些廢水基質(zhì)組成復(fù)雜，而雌激素又痕量存在，這對(duì)樣品前處理提出了較高的要求。

近年來，痕量有機(jī)物的儀器檢測技術(shù)有了很大的提高，如氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS/MS)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC/MS)、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(LC/MS/MS)等，具有較高的靈敏度和精確度。然而，對(duì)于實(shí)際環(huán)境樣品，由于基質(zhì)干擾作用，使分析方法的精確性和精密性大大降低。如何將復(fù)雜水樣中痕量存在的雌激素富集并凈化，成了水環(huán)境中雌激素分析的一個(gè)瓶頸。因次，建立回收率高、重現(xiàn)性好的適用于分析復(fù)雜基質(zhì)水體中痕量存在的雌激素及壬基酚、辛基酚、雙酚A的前處理方法是十分必要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)水體樣品中雌激素痕量存在、基質(zhì)干擾大、前處理技術(shù)難度大等問題，擬開發(fā)一種回收率高、靈敏度高、準(zhǔn)確、快速的分析技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)雌酮、17β-雌二醇、雌三醇、17α-乙炔基雌二醇、壬基酚、辛基酚和雙酚A的定量測定。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種檢測復(fù)雜基質(zhì)水體樣品中痕量雌酮、17β-雌二醇、雌三醇、17α-乙炔基雌二醇、壬基酚、辛基酚和雙酚A的定量測定方法。其特征在于該方法包括如下部分：

(1)HLB柱富集

水樣采用GF/F玻璃纖維濾膜進(jìn)行過濾，并用鹽酸調(diào)節(jié)pH為3；利用固相萃取裝置活化Waters公司的HLB固相萃取柱(200mg，6cc)，活化的順序?yàn)椋?mL色譜純乙酸乙酯、5mL色譜純甲醇及10mL超純水，流速為1mL/min；采用已活化的固相萃取柱對(duì)水樣進(jìn)行固相萃取富集，控制流速為3mL/min；富集完成后，首先用40％甲醇水溶液淋洗，再用甲醇/氨/水溶液淋洗，所述甲醇/氨/水溶液v/v/v＝10/2/88；淋洗結(jié)束后真空抽干10min，然后用甲醇洗脫，并將洗脫液氮吹干。

(2)Florisil柱凈化

用正己烷/二氯甲烷＝3/1(v/v)溶液重新溶解氮吹干后的殘?jiān)?，然后通過預(yù)先用正己烷活化好的Florisil固相萃取柱(500mg，6cc)，再用正己烷/二氯甲烷＝3/1(v/v)淋洗，最后用丙酮/二氯甲烷＝2/8(v/v)為洗脫劑進(jìn)行洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈?；殘?jiān)眉状级ㄈ荩鰷u混合后過0.22μm的尼龍濾頭待測。

(3)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀器為：Agilent?1100高效液相色譜系統(tǒng)，包括四元輸液泵，美國Agilent公司的自動(dòng)進(jìn)樣器；3200QTRAP型液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有電噴霧離子化源(ESI)以及Analyst?1.4.1數(shù)據(jù)處理軟件；

色譜柱：Nova-Pak?C18，3.9mm×150mm×4μm，Waters公司；離子源：電噴霧離子化源(ESI)，負(fù)離子方式檢測；離子噴射電壓：-4500V；溫度：450℃；源內(nèi)氣體1(GS1)，N₂，壓力：45psi；源內(nèi)氣體2(GS2)，N₂，壓力：45psi；氣簾氣體為N₂，壓力：20psi；掃描方式為多重反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；碰撞氣N₂的壓力為：Medium；HPLC流動(dòng)相梯度洗脫條件如表1所示：