[發明專利]一種鉛離子檢測試紙條及其制備方法

無效

• 申請號: 201210124736.0
• 申請日: 2012-04-25
• 公開（公告）號: CN102643917A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發明（設計）人: 王澤波;郭智勇;段靜;馬青青;郝婷婷;杜書平
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/44
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

1.一種鉛離子檢測試紙條，其特征在于：所述的試紙條由條形底板和在條形底板上依次搭接的樣品墊、涂覆特異性條形碼DNA-納米金-脫氧核酶探針的玻璃纖維結合墊、特定包被的硝酸纖維膜和吸水墊組成，所述的特異性條形碼DNA-納米金-脫氧核酶探針在脫氧核酶的一端結合有生物素，其另一端結合有納米金，在納米金表面結合有若干條條形碼DNA，在所述的硝酸纖維膜上，用鏈霉親合素包被直線式質控線C線，用生物素化的俘獲DNA和鏈霉親合素結合的復合物包被直線式檢測線T線，所述的生物素化的俘獲DNA的堿基與所述的特異性條形碼DNA-納米金-脫氧核酶探針表面的條形碼DNA的堿基之間互補配對，所述的特異性條形碼DNA-納米金-脫氧核酶探針的結構為

，所述的生物素化的俘獲DNA的結構為biotin-5'-TTTTTTTTTTTTTTT-3'，所述的納米金的直徑為13～30?nm。

2.根據權利要求1所述的一種鉛離子檢測試紙條，其特征在于：所述的樣品墊為經0.01～0.05?mol/L?Tris-HCl緩沖液浸泡處理的玻璃纖維紙，其中Tris-HCl緩沖液含蔗糖的質量百分比為1～10%，pH值為5.0～8.0。

3.根據權利要求1所述的一種鉛離子檢測試紙條，其特征在于：所述的特異性條形碼DNA-納米金-脫氧核酶探針溶液在所述的玻璃纖維結合墊上的噴涂量為2.0～10?μL/cm²。

4.根據權利要求3所述的一種鉛離子檢測試紙條，其特征在于：所述的特異性條形碼DNA-納米金-脫氧核酶探針溶液為2?μL的100?μM序列為biotin-3'-ACTGTAGAGAAGG?rA?TATCACAAAAAAAAAAAAAAA-5'-SH的DNA與2?μL的100?μM序列為5'-TGACATCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTG-3'的DNA混合均勻得脫氧核酶結合物，然后將8?μL的100?μM序列為HS-5'-AAAAAAAAAAAAAAA-3'條形碼DNA與脫氧核酶結合物混合均勻后，將4?mL的50?nM納米金溶液加入上述混合物中，溫育16?h后，離心棄去上清液，沉淀重新溶解于50?μL含100?mM?NaCl和8%蔗糖的25?mM?Tris-HCl緩沖液中所得。

5.根據權利要求1所述的一種鉛離子檢測試紙條，其特征在于：所述的生物素化的俘獲DNA和鏈霉親合素結合的復合物包被直線式檢測線T線制備過程如下：108?μL的100?μM的生物素化的俘獲DNA溶液與50?μL的2?mg/mL的鏈霉親合素溶液混合均勻，室溫下溫育2?h后，12000?rpm下離心10?min，棄去上清液，用54?μL的25?mM的PBS緩沖液重新溶解后，以1～3?μL/cm噴涂于硝酸纖維膜形成檢測線T線。

6.根據權利要求1所述的一種鉛離子檢測試紙條，其特征在于：所述的鏈霉親合素包被用量為1.0～3.0?μg/cm。