[發明專利]RecA介導的特異性目的DNA片段捕獲方法無效
| 申請號： | 201210120141.8 | 申請日： | 2012-04-20 |
| 公開（公告）號： | CN103374565A | 公開（公告）日： | 2013-10-30 |
| 發明（設計）人： | 于文強;張如奎 | 申請（專利權）人： | 復旦大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吳桂琴 |
| 地址： | 20043*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | reca 特異性 目的 dna 片段 捕獲 方法 | ||
【權利要求書】：
1.RecA介導的特異性目的DNA片段捕獲方法，其特征在于，在體外模擬RecA在體內同源重組中的作用模式，設計針對目的DNA片段的同源探針，通過RecA輔助探針和洗脫試劑，在含有RecA和ATP-γ-S的反應體系中特異性的捕獲樣品中的同源目標DNA片段。
2.按權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的同源探針是針對目的DNA片段中58bp長度的同源探針。
3.按權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的探針預先與RecA在37℃孵育，然后加入含有目標樣品的DNA繼續孵育，加入含有0.2％的NP40的1×RecA緩沖液洗滌非特異性DNA，最后通過洗脫試劑特異性地洗脫目的DNA片段。
4.按權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的樣品是經過酶切或超聲將基因組斷裂成500-1000bp的DNA片段。
5.按權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的洗脫試劑選自ATP或H2O。
6.按權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的洗滌非特異性的緩沖液中，含有Ca2+或Mg2+等二價陽離子。
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