[發明專利]樹鼩非酒精單純性脂肪肝動物模型的構建方法

無效

• 申請號: 201210106203.X
• 申請日: 2012-04-12
• 公開（公告）號: CN102696535A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 牛昱宇;王宏;司維;郭祥玉;司晨洋;王芳;張瓊書;施桂英
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明動物研究所
• 主分類號: A01K67/00
• 分類號: A01K67/00
• 代理公司: 昆明科陽知識產權代理事務所 53111
• 代理人: 孫山明

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技術領域

本發明屬于動物模型的建立方法，具體涉及利用動物構建非酒精性脂肪肝動物模型的方法。

背景技術

脂肪肝的發病率近幾年在歐美和中國迅速上升，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病。在白領人士、政府官員、高級知識分子等職業人群中脂肪肝的平均發病率約為25%；在肥胖人群與Ⅱ型糖尿病患者中脂肪肝的發病率約為50%；在嗜酒和酗酒者脂肪肝的發病率約為58%；在經常失眠、疲勞、不思茶飯、胃腸功能失調的亞健康人群中脂肪肝的發病率約為60%。

非酒精性脂肪肝病是指除酒精外和其他明確的肝臟損傷因素所致的以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變為主要特征的臨床病理綜合癥。依據病變肝組織是否伴有炎癥反應和纖維化，非酒精性脂肪肝病可分為：單純性脂肪肝、脂肪性肝炎和肝硬化。

理想的非酒精性脂肪肝動物模型應該具有：（1）模擬人類非酒精性脂肪肝的演變過程，具有人類脂肪肝病變特征。（2）形成率高，可控性強，重復性好，死亡率低。（3）方法簡便易行，價格低廉。在誘導不同類型的非酒精性脂肪肝動物模型的建立中，肝炎和肝硬化兩種動物模型較為常見，而單純性脂肪肝還少見報道。另一方面，由于人體肝臟功能的復雜性與實驗動物種族差異性、動物年齡的選擇、飼料的控制、造模時間以及模型判定指標尚缺乏統一標準等因素的影響，使任何一種實驗動物模型都不能全面、準確地反映人類脂肪肝的本質，尤其是單純性脂肪肝的本質。因此，利用與人類遺傳關系更接近的實驗動物建立單純性脂肪肝模型就顯得尤為重要，更能反映和研究人類單純性脂肪肝本質。

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用親緣關系更接近于人類的動物——樹鼩，建立造模時間短、造模成功率及造模效率高的非酒精單純性脂肪肝動物模型的方法。

本發明通過以下方式實現其目的：?

隨機選取成年雄性和雌性樹鼩作為模型動物，雄性成年體重120～140克，雌性成年體重110～130克，用高脂飼料供樹鼩自由采食，高脂飼料成分為：每公斤普通飼料加20g膽固醇和200g豬油，并提供純凈水自由飲用，持續飼養14周，該期間為造模期。

所述方法是在造模期內樹鼩普通飼料的營養成分為：19%<粗蛋白質<21%、4%<粗脂肪<5%。

所述方法進一步是隨機選取成年雄性和雌性樹鼩各10只作為模型動物的對照動物，雄性體重120～140克，雌性體重110～130克，自由采食普通飼料。

本發明具有以下優點和積極效果：

1、提供了一種利用親緣關系較接近于人類的樹鼩，建立非酒精單純性脂肪肝動物模型的方法。相對于大、小鼠，兔子等嚙齒類動物而言，樹鼩的親緣關系更接近于人類。因此，本發明用樹鼩誘導的脂肪肝動物模型更能反映人類脂肪肝的本質。

2、本發明單純性脂肪肝動物模型的建立方法安全可靠，所需的造模時間短，造模成功率和造模效率高，具有良好的應用前景。

3、通過建立單純性脂肪肝動物模型，可以用來研究脂肪肝的發生機制，篩選保肝藥物，探索保肝作用原理，甚至評價相關藥物對該種疾病的藥效評估，具有十分重要的意義。

附圖說明

圖1和圖2是DIASUS超聲儀10-22?MHz凸陣探頭掃描正常樹鼩肝組織超聲圖，肝組織回聲均勻，肝臟內管道結構分布清晰。

圖3為中度脂肪肝超聲圖，回聲不均勻。

圖4和圖5為重度脂肪肝超聲圖，回聲不均勻，肝臟內管道結構分布不清晰，肝臟腫大，肝前緣變鈍。

圖6和圖7分別為HE染色正常肝切片（200×）、（100×）圖。

圖8為HE染色輕度脂肪樣（200×）病變圖。

圖9為HE染色中度脂肪樣（200×）病變圖。

圖10為HE染色重度脂肪樣（200×）病變圖，肝細胞約有75%脂肪變。

圖11（100×）、圖12（200×）和圖13（400×）為HE染色重度脂肪樣病變圖，肝細胞約有95%脂肪變。

以下結合附圖對本發明做進一步說明，本發明包括但不限于實施例列舉的內容，如簡單地擴大建立的動物數量也應當視為本發明的保護范圍。

具體實施方式

（一）本發明模型的建立

實施例1：

隨機選取成年雄性和雌性樹鼩各20只作為模型動物，雄性成年體重120～140克，雌性成年體重110～130克，用高脂飼料由樹鼩自由采食，高脂飼料的成分為：每公斤普通飼料加20g膽固醇和200g豬油。在造模期內，所有動物皆自由飲水。