[發(fā)明專利]用于檢測血液中多西他賽濃度的試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210099620.6
• 申請日: 2012-04-06
• 公開（公告）號: CN102621325A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發(fā)明（設計）人: 李子樵;郭易萍
• 申請（專利權）人: 上海藍怡科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 何新平

1.一種用于檢測血液中多西他賽濃度的診斷試劑盒，包括試劑R1，以及結合有抗人多西他賽抗體的納米微球試劑R2，還包括多西他賽標準品；

試劑R1，包括緩沖液20-200mmol/L，穩(wěn)定劑2-20mmol/L，表面活性劑0.2-2mmol/L，無機鹽10-500mmol/L，促進劑1-5mmol/L，防腐劑1-5mmol/L；

試劑R2，包括結合有抗多西他賽抗體的納米微球0.1-10.0mg/ml，緩沖液20-200mmol/L，穩(wěn)定劑2-20mmol/L，還包括防腐劑1-5mmol/L；

多西他賽標準品，包括緩沖液20-200mmol/L，穩(wěn)定劑5-20mmol/L，防腐劑2-5mmol/L，0-100umol/L的多西他賽，其余為去離子水。

2.根據權利要求1所述的用于檢測血液中多西他賽濃度的診斷試劑盒，其特征在于：所述的試劑R1中緩沖液為MES緩沖液、三羥甲基氨基甲烷緩沖液或者甘氨酸緩沖液中的一種，緩沖液的PH值為6.0-8.0；

穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白、EDTA、EGTA、鉬酸鈉、鉬酸銨、谷氨酸鈉、或超氧化物歧化酶等中的一種或多種混合物；

無機鹽為氯化鉀、氯化鈉等中的一種或多種混合物；

表面活性劑為吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60或Triton?X-100中的一種；

促進劑為聚乙二醇6000、聚乙二醇8000等中的一種或多種混合物；

防腐劑為疊氮化鈉。

3.根據權利要求1所述的用于檢測血液中多西他賽濃度的診斷試劑盒，其特征在于：所述的試劑R2中，納米微球的直徑為50-200nm，納米微球與紫多西他賽抗體的結合方式為化學交聯法。

4.根據權利要求1所述的用于檢測血液中多西他賽濃度的診斷試劑盒，其特征在于：所述的試劑R2中，緩沖液為Mes緩沖液、三羥甲基氨基甲烷緩沖液、或甘氨酸緩沖液中的一種，緩沖液的PH值為6.0-8.0；

穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白、EDTA、EGTA、鉬酸鈉、鉬酸銨、谷氨酸鈉、超氧化物歧化酶、氯化鉀、氯化鈉中的一種或多種混合物；

防腐劑為疊氮化鈉。

5.根據權利要求1所述的用于檢測血液中多西他賽濃度的診斷試劑盒，其特征在于：所述的多西他賽標準品中，緩沖液為三羥甲基氨基甲烷緩沖液、Mes緩沖液或甘氨酸緩沖液中的一種，緩沖液的PH值為6.0-8.0；

穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白、EDTA、EGTA、鉬酸鈉、鉬酸銨、谷氨酸鈉、超氧化物歧化酶、氯化鉀、氯化鈉中的一種或多種混合物；

防腐劑為疊氮鈉。

6.根據權利要求3所述的用于檢測血液中多西他賽濃度的診斷試劑盒，其特征在于：所述納米微球與紫多西他賽抗體的結合方式為化學交聯法，包括乳膠粒子的活化以及多西他賽抗體和納米微球的結合，具體工藝步驟如下：

納米微球的活化：

A)取40-100ug多西他賽抗體加入2400ul?PH7.40的緩沖液，混勻備用；

B)取10-100mg直徑為50-200nm乳膠粒子，離心4℃20000rpm?20min，棄去濾液；

C)加入2000ul濃度為10mM，PH值為7.40磷酸緩沖液，并用超聲清洗劑溶解納米微球，離心清洗三次；

D)加入PH值為7.40的緩沖液，超聲，使納米微球活化濃度為2.5mg/ml；加入10mg-50mg的N-羥基琥珀酰亞胺和6.0mg-30.0mg?l-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；

E)室溫振蕩1h-3h；

F)4℃，20000rpm，20min，棄去濾液；

G)加入PH值為7.40的緩沖液，超聲處理，用于結合；

多西他賽抗體和納米微球的結合：

A)加入多西他賽抗體，使納米微球結合濃度為2.5mg/ml；

B)室溫振蕩2-16h；

C)4℃高速離心30-90min，棄去上清液；

D)用3000ul，PH值為7.40的緩沖液，超聲處理，穩(wěn)定劑2-20mmol/L，保存溶液至2-8℃。