[發(fā)明專利]一種富鐵黑木耳及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210094485.6 | 申請日： | 2012-04-01 |
| 公開（公告）號： | CN102630480A | 公開（公告）日： | 2012-08-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 黃陽;毛彥軍 | 申請（專利權(quán)）人： | 蘇州安德魯尹生物技術(shù)咨詢有限公司 |
| 主分類號： | A01G1/04 | 分類號： | A01G1/04;A01G31/00;C05G1/00 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 黑木耳 及其 制備 方法 | ||
1.一種富鐵黑木耳的制備方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：
1)母種制備：將黑木耳菌種接種到PDA綜合培養(yǎng)基中進行試管菌種培養(yǎng)得到初始試管菌種；
2)篩選耐受鐵能力強的黑木耳菌種：配制含鐵量為80-120?mg/L的PDA綜合培養(yǎng)基，將黑木耳菌種接種到其中培養(yǎng)，挑選出耐受鐵能力強的菌種作為馴化菌種；
3)馴化菌種；
4)分離純化菌種：將步驟3)中所得馴化菌種連續(xù)培養(yǎng)，分離純化出生長速率快、含鐵量高、對鐵的利用率高和耐性高的高耐鐵性黑木耳菌種；
5)將步驟4)中的高耐鐵性鐵黑木耳菌種接入經(jīng)滅菌處理的含鐵的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，進行黑木耳深層培養(yǎng)，得到富鐵黑木耳菌絲體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟?1)中的黑木耳菌種為：新科5號和916。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟3)中馴化菌種的方法為：將鐵源與PDA綜合培養(yǎng)基混合配置成不同濃度的含鐵PDA綜合培養(yǎng)基，采用菌懸液接種方式將耐受菌種接種到含鐵PDA綜合培養(yǎng)基上，按照鐵濃度從低到高的順序，逐一進行耐鐵馴化培養(yǎng)；當菌種生長出現(xiàn)下列情形之一：
i)菌種生長周期延長至前一鐵濃度的耐鐵培養(yǎng)基培養(yǎng)時的一倍以上；
ii)菌種生物量下降至前一鐵濃度的耐鐵培養(yǎng)基培養(yǎng)時的30%以下，甚至不生長；
iii)菌株明顯變色；
且相鄰批次耐鐵培養(yǎng)基的鐵濃度差值在預定閾值20?mg/L內(nèi)時，停止耐受培養(yǎng)，并確定黑木耳的最佳耐受鐵濃度為前一批次耐受培養(yǎng)基的鐵濃度和高耐鐵黑木耳菌種；
如果相鄰批次耐鐵培養(yǎng)基的鐵濃度差值大于預定閾值20?mg/L，調(diào)整耐鐵培養(yǎng)基的鐵濃度，使耐鐵培養(yǎng)基的鐵濃度大于前一批次耐鐵培養(yǎng)基的鐵濃度，且耐鐵培養(yǎng)基的鐵濃度小于當前批次耐鐵培養(yǎng)基的鐵濃度，然后以調(diào)整鐵濃度后的耐鐵培養(yǎng)基繼續(xù)進行耐鐵培養(yǎng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，篩選、馴化和分離純化菌種所用的培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯汁20?g，棉籽殼20?g，KH--2PO4?0.3?g,?MgSO4?0.15?g,?瓊脂2?g，H2O?100?ml,?pH無需調(diào)節(jié)，為自然狀態(tài)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟5)中黑木耳深層培養(yǎng)所用的液體發(fā)酵培養(yǎng)基的含鐵量為1800-2400?mg/L；所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：每100?ml培養(yǎng)基中，木屑100?g，葡萄糖1?g，麩皮汁20?g，石膏1?g，過磷酸鈣1?g，F(xiàn)eSO4·7H2O?894-1191?mg，pH無需調(diào)節(jié)，為自然狀態(tài)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟?5)中黑木耳深層培養(yǎng)的條件為：溫度為22-28℃，轉(zhuǎn)速為100-150轉(zhuǎn)/分。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述鐵源為硫酸亞鐵、氯化亞鐵、硝酸亞鐵、檸檬酸亞鐵、葡萄糖酸亞鐵或氨基酸螯合鐵。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述含鐵PDA綜合培養(yǎng)基是鐵濃度分別為150、200、250、300、320、350、400、450?mg/L的含鐵培養(yǎng)基。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述黑木耳完成馴化的含鐵培養(yǎng)基鐵濃度為420-480?mg/L。
10.一種高耐鐵性黑木耳，其特征在于，所述黑木耳是根據(jù)權(quán)利要求1-9任一所述的方法制備。
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