[發(fā)明專利]一種毛細(xì)管色譜柱的制備方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210086181.5
• 申請(qǐng)日: 2012-03-28
• 公開（公告）號(hào): CN102590402A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張博;吳清實(shí);戴思敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廈門大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/56
• 分類號(hào): G01N30/56
• 代理公司: 廈門南強(qiáng)之路專利事務(wù)所 35200
• 代理人: 馬應(yīng)森

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及毛細(xì)管色譜柱，尤其是涉及一種快速、批量制備毛細(xì)管色譜柱的方法。

背景技術(shù)

色譜柱是高效液相色譜儀的核心部件之一，是色譜分離的核心。毛細(xì)管柱是液相色譜柱中的一種，多采用內(nèi)徑50～300μm的彈性石英管制備，其較小的柱體積能顯著降低柱填料和流動(dòng)相的消耗，尤其適合微量與痕量樣品的分離分析，在液質(zhì)聯(lián)用和毛細(xì)管電色譜中應(yīng)用廣泛。

良好的制柱技術(shù)是獲得高柱效的基本因素，然而由于柱徑尺寸小，而且需要特殊的柱塞制作工藝使得毛細(xì)管色譜柱制備困難。目前，毛細(xì)管柱多采用高壓勻漿填充法制備，其它的制備方法如超臨界CO₂填充法、離心填充法以及電動(dòng)填充法均有報(bào)道。這些制柱方法多采用燒結(jié)法制備柱塞，單次填充只能得到一至兩根毛細(xì)管柱，而且由于操作等各方面的因素不能保證柱與柱之間的重現(xiàn)性。柱填充方法的復(fù)雜程度以及復(fù)雜的柱塞制備工藝限制了毛細(xì)管柱的制備效率。近來報(bào)道的單顆粒塞技術(shù)為柱塞的制備提供了新的選擇，柱塞制作工藝大為簡(jiǎn)化，為毛細(xì)管微柱快速、批量制備提供了可能。如何快速制備高柱效、高重現(xiàn)性的柱子是色譜柱填充制備的一個(gè)經(jīng)典問題，至今，未見有快速、批量制備毛細(xì)管微柱的報(bào)道。

中國(guó)專利CN101574644公開一種極性離子交換毛細(xì)管色譜柱及其制備方法：原料包括離子化合物單體，交聯(lián)劑，引發(fā)劑，致孔劑；將離子化合物單體和交聯(lián)劑在毛細(xì)管中進(jìn)行聚合反應(yīng)，加入致孔劑及引發(fā)劑，制備出極性離子交換毛細(xì)管色譜柱。該發(fā)明利用極性離子化合物單體聚合提供親水作用的固定相，并采用新型極性交聯(lián)劑，溶解離子化合物單體，解決了離子化合物單體和傳統(tǒng)疏水的交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二酯單體互溶難的問題。所述極性離子交換毛細(xì)管色譜柱具有強(qiáng)的親水作用，且能夠提供不同模式的離子交換功能，可滿足中性、酸性和堿性的極性物質(zhì)的連續(xù)快速分離要求；柱子通透性能好，適用高濃度的緩沖鹽體系；制備時(shí)不再需要在柱子兩端燒塞子，避免了填充柱子的困難。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在針對(duì)毛細(xì)管色譜柱制備過程復(fù)雜、制備周期長(zhǎng)、制備成功率低等問題，提供一種快速簡(jiǎn)便、高通量平行的毛細(xì)管色譜柱的制備方法。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是將所要填充的色譜填料制備成勻漿置于儲(chǔ)液槽中，使用多孔的單顆粒硅球置于毛細(xì)管內(nèi)制備柱塞，將毛細(xì)管與儲(chǔ)液槽聯(lián)通并豎直置于離心機(jī)上離心，填料在重力和離心力驅(qū)使下填裝入毛細(xì)管。

本發(fā)明包括以下步驟：

1)制備勻漿液

將要填充的顆粒填料加入丙酮中，制備成勻漿液；

2)制備出口柱塞

將粒徑尺寸大于毛細(xì)管內(nèi)徑的單個(gè)多孔硅球壓入毛細(xì)管一端，再將單顆粒硅球推至毛細(xì)管內(nèi)作為出口柱塞；

3)固定相填充

將毛細(xì)管入口端與儲(chǔ)液器聯(lián)通，向儲(chǔ)液器中加入勻漿液后置于離心機(jī)上離心，固定相在重力和離心力驅(qū)使下進(jìn)入毛細(xì)管柱；

4)制備入口柱塞

另將一顆單顆粒硅球壓入填充好的毛細(xì)管柱的入口端作為入口柱塞；

5)封存

將制備好的毛細(xì)管柱保存待用。

在步驟1)中，所述將要填充的顆粒填料加入丙酮中后最好在超聲波振蕩器中振蕩10min，使填料均勻分布于丙酮中；所述勻漿液的濃度可為5mg/ml。

在步驟2)中，所述將單顆粒硅球推至毛細(xì)管內(nèi)作為出口柱塞，可使用外徑較小的毛細(xì)管將單顆粒硅球推至毛細(xì)管內(nèi)作為出口柱塞。

在步驟5)中，所述保存可將制備好的毛細(xì)管柱保存在80％乙醇中。

本發(fā)明的方法簡(jiǎn)便快速，所使用的固定相不受限制，填充長(zhǎng)度不受限制，適合于不同內(nèi)徑尺寸的毛細(xì)管色譜柱的批量制備。

附圖說明

圖1是所制備的毛細(xì)管柱的液相色譜分離譜圖。

圖2是所制備的毛細(xì)管柱的電色譜分離譜圖。

在圖1和2中，橫坐標(biāo)為時(shí)間Time(sec)，縱坐標(biāo)為相對(duì)強(qiáng)度Abs(mAU)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

C18反相毛細(xì)管色譜柱的制備

1、制備勻漿液

稱取50mg粒徑為3μm的C18反相硅膠鍵合固定相，將所取的填料加入到10ml丙酮中制備成濃度為5mg/ml的勻漿液，手搖振蕩是溶液初步混勻，然后在超聲波振蕩儀中振蕩10min，使填料均勻地分布于丙酮中。

2、制備出口柱塞