[發明專利]微量游離mRNA提取和富集方法無效
| 申請號： | 201210083189.6 | 申請日： | 2012-03-26 |
| 公開（公告）號： | CN102676500A | 公開（公告）日： | 2012-09-19 |
| 發明（設計）人： | 劉寶瑞;沈潔;魏嘉 | 申請（專利權）人： | 南京大學醫學院附屬鼓樓醫院 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京中新達專利代理有限公司 32226 | 代理人： | 孫鷗;朱杰 |
| 地址： | 210008 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 微量 游離 mrna 提取 富集 方法 | ||
1.微量游離mRNA提取和富集方法，其步驟在于：
(1)抽取含微量游離mRNA的液體，兩次離心，獲取上清；
(2)取上清加入到Trizol?LS溶液中，室溫震蕩；
(3)向其中加入氯仿，劇烈震蕩；
(4)離心，吸取水相層至新管；
(5)加入70％乙醇，混勻；將含有乙醇和RNA的液體轉移到帶有濾網的收集管中，離心；
(6)洗滌濾網和濾網上的RNA；
(7)離心，干燥濾網和RNA；
(8)加無RNA酶水溶解RNA，離心；
(9)加入DNA酶；
(10)終止DNA酶反應，離心，獲得最終富集并純化的RNA，以其為模板，反轉錄為cDNA，-20℃保存。
2.根據權利要求1所述的微量游離mRNA提取和富集方法，其特征在于步驟(1)中離心機先為3000g，4℃離心10分鐘，獲得上清后12000g，4℃離心10分鐘。
3.根據權利要求1所述的微量游離mRNA提取和富集方法，其特征在于步驟(2)中取750ul上清，加入2250ul?Trizol?LS溶液中，即上清與Trizol?LS的體積比為1∶3，上清的起始量為750ul。
4.根據權利要求1所述的微量游離mRNA提取和富集方法，其特征在于步驟(8)中無RNA酶水的量為33ul。
5.根據權利要求1所述的微量游離mRNA提取和富集方法，其特征在于步驟(9)中加入10×DNA酶緩沖液6ul和1.5ul?DNA酶，37℃孵育30分鐘。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于南京大學醫學院附屬鼓樓醫院，未經南京大學醫學院附屬鼓樓醫院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201210083189.6/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：一種內收線捻股機雙計米裝置
- 下一篇：一種大型塔類設備的吊裝方法
