[發(fā)明專利]重組鏈球菌溶血素O蛋白、核苷酸序列、制備方法及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210069881.3
• 申請日: 2012-03-16
• 公開（公告）號: CN103304645A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉平;余枝廣;黃斌;李印軍;蔡錦剛
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司
• 主分類號: C07K14/315
• 分類號: C07K14/315;C12N15/31;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;G01N33/68;C12Q1/68;C12R1/46
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44281
• 代理人: 羅瑤

1.一種重組鏈球菌溶血素O蛋白，其特征在于，所述蛋白的序列為將天然鏈球菌溶血素O蛋白的第530位半胱氨酸缺失，或突變?yōu)閄aa，且缺失天然鏈球菌溶血素O蛋白N端的77個氨基酸，所述Xaa選自Ala、Arg、Asn、Asp、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val；

優(yōu)選的，Xaa為Ser、Thr或Ala；

更優(yōu)選的，Xaa為Ala。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組鏈球菌溶血素O蛋白，其特征在于，所述重組鏈球菌溶血素O蛋白的氨基酸序列為SEQ?ID?NO.2。

3.編碼權(quán)利要求1或2所述的重組鏈球菌溶血素O蛋白的核苷酸序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核苷酸序列，其特征在于：

所述核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1；或

所述核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1所示序列進行1個或幾個核苷酸取代而得到的密碼子同義突變的核苷酸序列。

5.一種抗原，其特征在于：所述抗原的氨基酸序列中包含：

權(quán)利要求1所述的重組鏈球菌溶血素O蛋白的氨基酸序列；或

SEQ?ID?NO.2所示序列。

6.一種載體，其特征在于，所述載體包含權(quán)利要求3或權(quán)利要求4所述的核苷酸序列；或

所述載體由權(quán)利要求3或權(quán)利要求4所述的核苷酸序列與表達載體經(jīng)重組得到。

7.根據(jù)權(quán)利要求6的載體，其特征在于，所述表達載體為pET21W7或pEGFP_BMP7。

8.一種重組細胞，其特征在于，所述重組細胞包含：

權(quán)利要求3或權(quán)利要求4所述的核苷酸序列；或

權(quán)利要求6或7所述的載體。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的重組細胞，其特征在于，所述重組細胞的宿主細胞為BL21(d3)-gold、HepG2、JM109或HB101。

10.制備權(quán)利要求1或2所述的重組鏈球菌溶血素O蛋白的方法，所述方法包括：

(1)合成權(quán)利要求3所述的核苷酸序列；

(2)將步驟(1)獲得的核苷酸序列構(gòu)建載體；

(3)將步驟(2)的載體轉(zhuǎn)化宿主細胞獲得重組細胞；

(4)培養(yǎng)并收集重組細胞，純化提取重組鏈球菌溶血素O蛋白。

11.權(quán)利要求1或2所述的重組鏈球菌溶血素O蛋白，或權(quán)利要求3或4所述的核苷酸序列，或權(quán)利要求5所述的抗原在鏈球菌檢測領(lǐng)域或抗鏈球菌溶血素O抗體檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用。

12.一種抗鏈球菌溶血素O抗體檢測試劑，其特征在于，所述試劑中含有：權(quán)利要求1或2所述重組鏈球菌溶血素O蛋白；或

權(quán)利要求5所述的抗原。

13.根據(jù)權(quán)利要求12的抗鏈球菌溶血素O抗體檢測試劑，其特征在于，所述試劑中含有：權(quán)利要求1或2所述的重組鏈球菌溶血素O蛋白結(jié)合或偶聯(lián)固相載體或信號分子；或

權(quán)利要求5所述的抗原結(jié)合或偶聯(lián)固相載體或信號分子。