[發明專利]骨髓間質干細胞在制備治療自身免疫性疾病藥物中的應用有效
| 申請號: | 201210061129.4 | 申請日: | 2009-02-18 |
| 公開(公告)號: | CN102631368A | 公開(公告)日: | 2012-08-15 |
| 發明(設計)人: | 孫凌云;馮學兵;張華勇 | 申請(專利權)人: | 南京大學醫學院附屬鼓樓醫院 |
| 主分類號: | A61K35/28 | 分類號: | A61K35/28;C12N5/0775;A61P17/00;A61P19/04;A61P21/00 |
| 代理公司: | 南京眾聯專利代理有限公司 32206 | 代理人: | 顧進 |
| 地址: | 210008 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 骨髓 間質 干細胞 制備 治療 自身免疫 性疾病 藥物 中的 應用 | ||
1.骨髓間質干細胞在制備治療多發性肌炎和皮肌炎藥物中的應用。
2.根據權利要求1所述骨髓間質干細胞在制備治療多發性肌炎和皮肌炎藥物中的應用,所述的骨髓間質干細胞按照如下方法制備:
(1)取髂后上棘為穿刺點,用肝素稀釋液接入穿刺針接口,緩慢抽取骨髓,并用PBS稀釋;
(2)向淋巴細胞分離液中加入經過步驟(1)所述骨髓的稀釋液液,離心后,吸出灰白色的淋巴細胞,然后用PBS洗滌;
(3)在37℃、5%?CO2、飽和濕度CO2培養箱中,將步驟(2)得到的淋巴細胞,用含10%胎牛血清的L-DMEM完全培養液培養,24?h后首次換液,去掉非貼壁細胞,以后每三天以L-DMEM完全培養液換液;
(4)培養至貼壁細胞90%融合時,進行傳代,用PBS洗滌細胞,用胰酶消化,PBS洗滌后,置37℃、5?%CO2、飽和濕度CO2培養箱培養中用L-DMEM完全培養液培養;?
(5)取各代骨髓間質干細胞測定細胞表面標記并測定其核型,得具有間質干細胞特征且染色體核型正常的骨髓間質干細胞。
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