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[發明專利]骨髓間質干細胞在制備治療自身免疫性疾病藥物中的應用有效

專利信息
申請號: 201210061129.4 申請日: 2009-02-18
公開(公告)號: CN102631368A 公開(公告)日: 2012-08-15
發明(設計)人: 孫凌云;馮學兵;張華勇 申請(專利權)人: 南京大學醫學院附屬鼓樓醫院
主分類號: A61K35/28 分類號: A61K35/28;C12N5/0775;A61P17/00;A61P19/04;A61P21/00
代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206 代理人: 顧進
地址: 210008 *** 國省代碼: 江蘇;32
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 骨髓 間質 干細胞 制備 治療 自身免疫 性疾病 藥物 中的 應用
【權利要求書】:

1.骨髓間質干細胞在制備治療多發性肌炎和皮肌炎藥物中的應用。

2.根據權利要求1所述骨髓間質干細胞在制備治療多發性肌炎和皮肌炎藥物中的應用,所述的骨髓間質干細胞按照如下方法制備:

(1)取髂后上棘為穿刺點,用肝素稀釋液接入穿刺針接口,緩慢抽取骨髓,并用PBS稀釋;

(2)向淋巴細胞分離液中加入經過步驟(1)所述骨髓的稀釋液液,離心后,吸出灰白色的淋巴細胞,然后用PBS洗滌;

(3)在37℃、5%?CO2、飽和濕度CO2培養箱中,將步驟(2)得到的淋巴細胞,用含10%胎牛血清的L-DMEM完全培養液培養,24?h后首次換液,去掉非貼壁細胞,以后每三天以L-DMEM完全培養液換液;

(4)培養至貼壁細胞90%融合時,進行傳代,用PBS洗滌細胞,用胰酶消化,PBS洗滌后,置37℃、5?%CO2、飽和濕度CO2培養箱培養中用L-DMEM完全培養液培養;?

(5)取各代骨髓間質干細胞測定細胞表面標記并測定其核型,得具有間質干細胞特征且染色體核型正常的骨髓間質干細胞。

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