[發明專利]東亞鉗蝎蝎毒中的GPCR活性多肽及其提取分離和應用

有效

• 申請號: 201210058463.4
• 申請日: 2012-03-07
• 公開（公告）號: CN103304630A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 梁鑫淼;許俊彥;張巖;張秀莉;王志偉;奧利維爾·奇韋利
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/20;C07K1/16;C07K1/14;A61K38/08;A61P25/04
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.一種東亞鉗蝎蝎毒中的GPCR活性多肽，其特征在于：

為下述活性多肽之一，

BmK-YA該多肽由Tyr-Gly-Gly-Tyr-Met-Asn-Pro-Ala-amide組成的八肽；

或，基于BmK-YA的序列改造的GPCR活性多肽Phe⁴-BmK-YA，該多肽的序列為Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Asn-Pro-Ala-amide。

2.根據權利要求1所述的多肽，其特征在于：該多肽的C-端被酰胺化，多肽BmK-YA分子量870.3088Da。

3.一種權利要求1所述多肽的提取分離方法，其特征在于：該多肽是從東亞鉗蝎蝎毒中分離得到的，具體過程為，

a.將東亞鉗蝎蝎毒上樣至C18固相萃取柱進行固相萃取，先用含體積濃度0.1％TFA的體積濃度5-10％乙腈淋洗，然后用含體積濃度0.1％TFA的體積濃度20-60％乙腈洗脫，將洗脫液凍干；

b.將上述凍干樣品采用反相色譜進行第一維分離，

采用含體積濃度0.05％TFA的乙腈水溶液線性梯度洗脫，0-50min：線性洗脫過程洗脫液中乙腈的體積濃度由2-10％乙腈升至20-40％乙腈，收集餾分，當洗脫劑乙腈的體積濃度為14％-16％時收集到的餾分為活性餾分；

c.將上述活性餾分進一步用親水色譜進行第二維分離，流動相為：純水(A)，乙腈(B)，100mM磷酸三乙胺緩沖鹽(C)，線性梯度洗脫過程洗脫液中流動相C的體積濃度一直維持2-20％不變；0-60min：線性梯度洗脫過程洗脫液中流動相A的體積濃度由5-10％變化為30-40％，流動相B的體積濃度由93-70％變化為68-40％，且線性梯度洗脫過程洗脫液中流動相A+B+C的體積濃度等于100％，當洗脫液中的水含量為22％-24％的時候收集得活性多肽。

4.一種權利要求1所述多肽作為活性組份在制備鎮痛藥中的應用。

5.根據權利要求4所述多肽的應用，其特征在于：該多肽能夠作用于μ-，δ-和κ-阿片受體，其中對δ-阿片受體的活性最高，臨床上可作為鎮痛藥應用。