[發(fā)明專利]白及藥材的含量測(cè)定方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210054732.X
• 申請(qǐng)日: 2012-03-05
• 公開（公告）號(hào): CN103293261A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 竇啟玲;楊青波;唐修靜;張羽斌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貴州益佰制藥股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種白及藥材的含量測(cè)定方法，其特征在于：所述高效液相色譜法由以下步驟組成：

(1)色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：色譜柱：依利特ods柱_??200*4.6mm,5μm?檢測(cè)器為二極管陣列檢測(cè)器，流動(dòng)相：甲醇與0.02%磷酸水溶液體積比為20-50∶80-50，檢測(cè)波長(zhǎng)為200-300nm，柱溫40℃，流速0.5-2ml/min，理論塔板數(shù)按雙[4-(β-D-吡喃葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯計(jì)算不低于5000；

(2)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取雙[4-(β-D-吡喃葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯對(duì)照品，加甲醇溶液制成每1ml含1mg的溶液，即得；

(3)供試品溶液的制備：精密稱定白及藥材粉末0.35g，精密加入甲醇30-70ml，稱定重量，回流提取100-130分鐘，放至室溫，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；

(4)測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液20μL，供試品溶液10μL，注入高效液相色譜，測(cè)定，計(jì)算含量，即得。

2.按照權(quán)利要求1所述白及藥材的含量測(cè)定方法，其特征在于：所述高效液相色譜法由以下步驟組成：

(1)色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：色譜柱：依利特ods柱_??200*4.6mm,5μm?檢測(cè)器為二極管陣列檢測(cè)器，流動(dòng)相：甲醇與0.02%磷酸水溶液體積比為37∶63，檢測(cè)波長(zhǎng)為223nm，柱溫40℃，流速1ml/min，理論塔板數(shù)按雙[4-(β-D-吡喃葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯計(jì)算不低于5000；

(2)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取雙[4-(β-D-吡喃葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯對(duì)照品，加甲醇溶液制成每1ml含1mg的溶液，即得；

(3)供試品溶液的制備：精密稱定白及藥材粉末0.35g，精密加入甲醇50ml，稱定重量，回流提取120分鐘，放至室溫，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；

(4)測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液20μL，供試品溶液10μL，注入高效液相色譜，測(cè)定，計(jì)算含量，即得。

3.按照權(quán)利要求1或2所述白及藥材的含量測(cè)定方法，其特征在于：按白及藥材干燥品計(jì)算，雙[4-(β-D-吡喃葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯(militarine)的含量不少于1.0％重量份。

4.按照權(quán)利要求1或2所述白及藥材的含量測(cè)定方法，其特征在于：步驟（2）中對(duì)照品的制備方法為：

取白及藥材，粉碎過20目篩，取白及藥粉，用3-8倍量甲醇回流提取1-3次，每次2-4小時(shí)，濾過，合并濾液，回收甲醇，濃縮，浸膏加入2-3倍量水分散；依次以體積比1：1的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取3-4次，回收試劑，濃縮成浸膏；將正丁醇部分的浸膏，上大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用20-50%乙醇洗脫，其中乙醇洗脫部分，回收溶劑后，上硅膠柱，用氯仿：甲醇溶劑系統(tǒng)洗脫，其中第2部分再反復(fù)上硅膠柱，用SephdexLH-20柱分離純化得到白色粉末。

5.按照權(quán)利要求4所述白及藥材的含量測(cè)定方法，其特征在于：步驟（2）中對(duì)照品的制備方法為：取白及藥材，粉碎過20目篩，取白及藥粉，用5倍量甲醇回流提取2次，每次3小時(shí)，濾過，合并濾液，回收甲醇，濃縮，浸膏加入2.5倍量水分散；依次以體積比1：1的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取3次，回收試劑，濃縮成浸膏；將正丁醇部分的浸膏，上大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用30%乙醇洗脫，其中乙醇洗脫部分，回收溶劑后，上硅膠柱，用氯仿：甲醇溶劑系統(tǒng)洗脫，其中第2部分再反復(fù)上硅膠柱，用SephdexLH-20柱分離純化得到白色粉末。